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两水相提取黑木耳中多糖的研究及条件优化 第7页

更新时间:2016-8-21:  来源:毕业论文
苯酚溶液:精确称取固体苯酚12.5g,置于250 mL的容量瓶中,用水稀释至刻度线,摇匀,得60g/L的苯酚溶液,避光冷藏。
(B) 标准曲线绘制
精确称取105℃干燥至恒重的标准葡萄糖20 mg,用100 ml重蒸水定容。标准液稀释成浓度为3O,6O,90,120,150和180 g/ml的溶液,分别吸取稀释液0.5ml,加人5Og/L苯酚1.0ml混合后迅速加人5ml浓硫酸,混合均匀后,30℃放置30min,在波长490nm处测定光密度,空白对照以重蒸水代替糖溶液。以糖浓度(C)为横坐标,光密度(OD)为纵坐标,制作标准曲线。

图2.1 标准葡萄糖曲线
2.2.4 多糖含量的测定以及计算
直接从黑木耳粗多糖提取液中吸取0.5mL多糖提取液,加入1mL苯酚溶液,5mL浓硫酸,摇匀,置沸水浴中加热15min,然后在冷水中冷却30min,在490nm下测光密度。根据吸光度从葡萄糖标准曲线上计算出所对应的葡萄糖浓度。
2.3 两水相萃取的相关计算
双水相萃取的聚合物不相容性:根据热力学第二定律,混合是熵增过程可以自发进行,但分子间存在相互作用力,这种分子间作用力随相对分子质量增大而增大。当两种高分子聚合物之间存在相互排斥作用时,由于相对分子质量较大的分子间的排斥作用与混合熵相比占主导地位,即一种聚合物分子的周围将聚集同种分子而排斥异种分子,当达到平衡时,即形成分别富含不同聚合物的两相。这种含有聚合物分子的溶液发生分相的现象称为聚合物的不相溶性。党员争先创优承诺书
当萃取达到平衡时,提取物质在上、下亮相中的浓度之比,称为分配系数K,可用公式表示:
                         K=C1/C2                             (2.1)
式中C1、C2分别代表上下相提取物质的浓度
相比就是萃取相体积比上萃取余相体积,可用公式表示:
                                 R=V1/V 2                                  (2.2)
式中V1、V2 分别代表萃取相体积和上萃取余相体积
多糖萃取率公式:
                                 η=1/(1+1/RK)                    (2.3)
2.4.两水相萃取黑木耳多糖的工艺流程
    PEG相图的制作→黑木耳的预处理→加入双水相体系中→离心→根据标准曲线测上下相多糖的含量→进行相关的计算

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