（A）溶液的配置
配置43%（g/ml）(NH4)2 SO4溶液：将430.0g(NH4)2 SO4固体加水定容至1000ml。
（B）相图的制作
精确称取PEG400 0.7g左右于大试管中，加入0.5ml去离子水，用移液管滴加已配好的硫酸铵溶液，并不断在旋涡混合器上混合，观察溶液的澄清程度，直至事关内溶液开始浑浊位置，记录硫酸铵溶液的加量（ml）根据密度值求出质量（g），然后继续加入水，使溶液澄清（加水量根据点子的密集程度控制），继续加硫酸铵溶液不算混匀，直至浑浊，反复操作，计算每次打到浑浊时PEG和(NH4)2 SO4在系统中的质量分数（g/g）。以PEG质量分数为纵坐标，(NH4)2 SO4质量分数为横坐标作图。
其他分子量的PEG配成50%的溶液按照步骤（B）重复操作。
2.4.2 黑木耳的预处理
黑木耳颗粒的粒度越小，单位体积颗粒表面积越大，则相同条件下黑木耳粗多糖溶出率也越大。但若选用的黑木耳粒度过小，则在筛选或实验过程中损失较大，所以,黑木耳经过除杂质，粉碎后选用适中的筛子将黑木耳粉进行筛选，本课题选用60目筛子，通过筛选得到粒度适中的黑木耳干粉。
称取经筛分后的黑木耳粉末5.0克，加入100ml水，在70℃下恒温3.5小时，之后倒于刻度离心管中高速离心，离心机转速3600转/分本文来自辣,文,论#文,网，
毕业论文 www.751com.cn 加7位QQ324.9114找源文，离心时间10分钟，离心后取上清液并扔废渣。
2.4.3 PEG分子量对于黑木耳多糖提取率的影响
形成两水相的PEG分子量影响了系统的粘度和多糖的分配系数，是影响多糖萃取率的重要因素．因此，首先要确定形成两水相的PEG分子量．根据相图，采用PEG400，600，1000，2000，4000，进行实验，准确称取各个分子量的PEG 2.6g，硫酸铵1.5g放入刻度离心管中再加入5ml蒸馏水，然后取0.5ml黑木耳预处理液加入刻度离心管中50℃水浴30分钟，最后放入高速离心机中离心5min（3000转/分）。
分相后按照2.2.4步骤分别测定上下相的多糖浓度。然后按照公式（2.3）计算多糖萃取率。
表2.4 PEG分子量实验条件表
个人党性分析报告PEG分子量 PEG质量分数（%） 硫酸铵质量分数（%） 黑木耳预处理液（ml） 温度（℃）
400 29 11 0.5 50
600 29 11 0.5 50
1000 29 11 0.5 50
2000 29 11 0.5 50
4000 29 11 0.5 50
5
2.4.4 硫酸铵质量百分浓度对黑木耳多糖提取率的影响
根据2.4.3实验结果，用PEG400的两水相萃取木耳多糖时，其萃取率最高．因此，以下实验均以PEG400形成的两水相进行实验。
固定PEG400质量分数20%，改变硫酸铵的质量分数20%、25%、30%、35%、40%，配置两水相体系（参照表2.5），用蒸馏水水将每离心管调至13g，然后50℃水浴30min，最后高速离心5min（3000转/分）。
上一页 [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8]
两水相提取黑木耳中多糖的研究及条件优化 第8页下载如图片无法显示或论文不完整，请联系qq752018766
