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油菜核盘菌的分离鉴定及侵染分析 第2页

更新时间:2016-9-11:  来源:毕业论文
油菜属十字花科(Cruciferae),分芸苔属(Brassica)和罗卜属(Raphanus)7个种,其中大面积栽种品种约20余个,是四大油料作物(大豆、向日葵、油菜、花生)之一,在世界油料作物中占有重要地位,油菜的一生要经历苗期、蕾薹期、开花期和成熟期四个不同的生育阶段,每个阶段出现问题都有可能影响油菜的最后产量。油菜菌核病是油菜生产中的重要病害之一,常年株发病率高达10%-30%,严重的达8O%以上;病株一般减产70%-100%。菌核病的病原菌为核盘菌(Sclerotinia species),属子囊菌亚门,有三个主要的形态特征,分别是子囊孢子、菌丝体、菌核,其分布地区广泛、致病性强。核盘菌侵染植物时,菌核通过萌发产生菌丝或子囊盘去侵染植株,导致植株被侵染的部位糜烂。目前,我国已发现的菌核病病原菌的划分尚不明确,所以准确判定菌核病的种类和生理小种的分化,对菌核病防治和选育抗病品种具有重要的科学指导意义。核盘菌分四种侵染循环类型:类型一:土传病害类型:其特点是子囊孢子在侵染循环过程中不起作用,本文来自辣~文\论|文/网,毕业论文 www.751com.cn 加7位QQ324'9114找源文以菌丝体初侵染,病健组织接触构成再侵染。类型二:子囊孢子气传病害类型:其特点是气传的子囊孢子由于强致病力,从寄主的花、衰老的叶或伤口侵入,病健组织接触构成再侵染。类型三:分生孢干气传病害类型:其特点是在自然条件下未见有性世代,以气传的分生孢子从寄主的花和衰老的叶侵染,以分生孢子和病健株接触构成再侵染。类型四:气传、种传、土传病害兼有型:其特点是子囊孢子从花或茎侵染,造成盘腐和茎腐,菌核、带菌种子萌生菌丝体侵染造成苗腐和粒枯,病健组织接触构成再侵染。核盘菌侵染油菜时则主要以前三种类型为主[1]。
ITS,真核核糖体基因转录间隔区,又叫做内转录间隔区,是位于真菌核糖体DNA(rDNA)上18S 和28S 基因之间的区域片段,主要包括内转录间隔区1(ITS1)、5.8S rDNA、内转录间隔区2(ITS2)。rDNA在真菌种间保持着不同程度的变异,在种内则由于基因的交流而经常表现出很高的同源性,变异的多少能够反映出生物进化上属内种间亲缘关系的远近。ITS1和ITS2 作为非编码区,与核糖体DNA 中的18S、5.8S 和28S 的基因组序列相比较,承受的进化选择压力较小,变异相对较大,在种间表现出较高的差异性,能为研究真菌的分类鉴定和分子检测提供大量的遗传信息[2]。DAB(3,3’-Diaminobenzidine 4Hcl),即 3,3’-二氨基联苯胺,是辣根过氧化物酶作用的底物,其终产物为黄棕色沉淀,不溶于有机溶剂。其作用机制为植物被病毒侵染后,有的发生过敏性坏死反应,坏死的细胞内含有H2O2,DAB( 3,3’-Diaminobenzidine 4Hcl)和HRP(过氧化物酶)反应产生棕色的不溶物,通过DAB染色,可以观察到植物坏死细胞所在的位置[3]。该染色剂性能稳定,操作便捷,敏感度高,显色清晰,重复性好。

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