.1 供试材料
用于侵染实验所用的菌种是由从感染油菜中分离纯化好的核盘菌，被侵染植物为实验室种植的番茄和拟南芥。
1.2 供试培养基
马铃薯培养基（PDA）：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂16g。马铃薯洗净去皮，切成小块，放入1000ml水中煮沸30min，用4层纱布过滤，加入琼脂和葡萄糖，搅拌至溶解后补足水分至1000ml，分装、包扎，灭菌。
1.3 供试试剂
75%的酒精，0.1%的升汞，蒸馏水，2%CTAB抽提缓冲液，2-巯基乙醇，氯仿，异戊醇，无水乙醇，TE缓冲液，DAB，台盼蓝染色试剂，固定液，水合三氯乙醛等。
2.实验方法
2.1 核盘菌的显微形态分析
将分离后的菌种放入PDA培养基中心，在25℃培养箱中分离纯化培养[4-5]，对PDA固体培养基平板和显微镜下不同时期的菌落和菌丝颜色、形状和大小进行观察，拍照并纪录。
2.2 核盘菌ITS序列分析
2.2.1 核盘菌DNA的提取
本实验采取CTAB法提取DNA[6]。
在PDA平板培养基上刮取100g菌丝，在灭菌研钵中加入液氮充分研磨至粉末状，再加入3ml预热的2%的CTAB抽提缓冲液和50µL的2-巯基乙醇，继续研磨至糊状或粥状，转入离心管中，于65℃水浴加热60min，待冷却至室温后加入600µL氯仿/异戊醇（氯仿：异戊醇=24:1），混匀震荡再常温10000rpm离心10 min，取上清液转入另一离心管，在此离心管中再加入600µL，再离心震荡取上清液,在上清液加入2.5倍体积无水乙醇，-20℃冷冻30min以上沉淀DNA，在4℃，12000rmp离心10min，弃去上层有机溶剂，加500µL75%乙醇洗涤沉淀，在4℃，8000rmp离心5min，弃去上清，洗涤沉淀3次后倒置37℃培养箱烘干，加50µLTE缓冲液溶解DNA，于-20℃冷藏备用。
2.2.2 PCR的扩增和检测
本实验扩增ITS片段用引物ITS1、ITS4[7]： ITS1：5’TCCGTAGGTGAACCTGCGG3’，ITS4：5’TCCTCCGCTTATTGATATGC3’；扩增采用20µL反应体系；各组分为：灭菌去离子水9µL，Buffer2µL,dNTP2µL,引物ITS1和ITS4各1.5µL,TaqDNA聚合酶2µL，DNA模板2µL。扩增程序：94℃变性5mim；94℃变性30s,48℃退火45s,72℃延伸1mim,35个循环；72℃延伸5min。PCR扩增产物测序后与GenBank中核酸数据库中已知种的DNA序列比，构建系统进化树来推演系统发生关系。
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