引言
根据波长与生物学效应之间的差异,可将紫外线划分为UV2A(320-400nm)、UV2B(280-320 nm)、UV2C(210-280 nm)。穿过臭氧层的紫外线,在260nm处有一个吸收峰,它会一直持续到340nm波长的UV2A光域[1]。因为臭氧层的这种吸收作用,使300nm以下的紫外线不能照射到地球表面,起到保护地球生物的作用。但是,随着工业发展速度的加快,排到大气层中氧化氮、氯氟烃类等含量就会上升,使得大气中的臭氧层出现破洞而使地球表面的UV-B量增加,就会严重影响生物圈的平衡[2]。关于UV-B对植物生理影响的研究,国内外的报道已经很多。UV-B照射天数的增加,可以导致植物分蘖变少、植株变矮、光合速率下降、叶绿素降低、可溶性蛋白质含量降低、植物产量降低[3]、细胞膜受损[4]、叶片的气孔关闭[5],因此会对农作物带来不同程度的伤害。本实验主要通过培育大豆愈伤组织[6-9],然后UV-B照射5天,每天照射两个小时,且这两个小时分别在上午和下午照射。从缓解UV-B对植物的伤害的角度出发,每照射一天就测出一天的生理指标,研究UV-B对大豆愈伤组织生理生化特性的影响,从而实现对UV-B照射危害的预测、评价和防治。对于保证作物的产量、品质和防止UV-B的危害都有重要的意义。这也为缓解农业生产中UV-B的伤害提供了一种新的思路和方法。
1材料和方法
1.1材料准备
实验材料为“巨丰-1”大豆,选用颗粒饱满且表面光滑无破损的大豆。用流水将大豆种子冲洗干净后用75%的酒精消毒1min,再用0.1%的HgCl2浸泡10min后用无菌水冲洗5次。处理完成后暗处萌发24小时,然后在超净工作台中进行接种将大豆胚接种到诱导愈伤组织的培养基(MS培养基 + 3mg/mL 2,4-D + 2mg/mL 6-BA)上,每瓶中接种三个种胚。最后在弱光25度条件下培养15-20天形成愈伤组织。
1.2材料处理
挑选生长状况良好的大豆愈伤组织,一部分愈伤组织不处理留作对照(CK),将其它大豆愈伤组织置于UV-B下进行不同时间的照射。照射时间为每天上午8:00-10:00,分别处理1d、2d、3d、4d、5d,每次处理后立即测定相应的生理指标。
1.3测定项目与方法
经UV-B处理大豆愈伤组织后,在每天的上午8:00开始测试生理指标。采用蒽酮比色法测定可溶性糖的含量[10];采用考马斯亮蓝G-250法测定可溶性蛋白的含量[10];采用磺基水杨酸浸提法测定游离脯氨酸的含量[11];采用硫代巴比妥酸本文来自辣)文^论(文/网,
毕业论文 www.751com.cn 加7位QQ324-9114找源文(TBA)法测定MDA的含量[12];采用羟胺氧化法测定超氧阴离子的含量[11],采用电导仪法测定相对电导率(质膜相对透性)[11]。
1.4数据分析
所得的所有数据均取3次重复的平均值,然后采用 Microsoft Excel 2003统计分析软件作图进行数据分析,采用SPSS 10.0统计分析软件进行差异显著性的检验。
2结果分析
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