1.2 方法
1.2.1 培养基的配制和灭菌
YPD培养基（1L）：酵母浸粉10g，胰蛋白胨20g，葡萄糖200g，琼脂粉15g；察氏培养基（1L）：蔗糖30g，硝酸钠3g，硫酸镁0.5g，氯化钾0.5g，磷酸氢二钾1g，硫酸亚铁0.001g，琼脂粉15g，配好的培养基在121℃下灭菌20min。
1.2.2 酵母细胞的活化
从-80℃超低温冰箱里取出固化的酵母细胞常温下快速融化，直接在超净工作台里进行稀释。之后放到30℃摇床里进行培养24h，最后用50%的甘油以1：1的比例进行保存放在冰箱备用。
1.2.3 平板培养法测试TiO2对酵母的抗菌性
在无菌室操作台上进行TiO2粉末对酵母抗菌性测定，具体操作步骤如下：
（1）将冰箱中活化后保存的酵母菌液取出，加灭菌的YPD液体稀释至1000倍作为原菌悬液。
（2）配制一定量的YPD固体培养基进行灭菌，倒平板。本文来自辣*文~论'文&网，
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（3）称取TiO2纳米粒子粉末和掺杂型TiO2纳米粒子粉末放入不同锥形瓶里，配制成0.2%、0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%辣个浓度，高压灭菌备用。
（4）取灭过菌的离心管，向里面滴加稀释后的菌50μL，之后向离心管里分别滴加浓度为0.2%、0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%的TiO2纳米粒子溶液50μL。将装有不同浓度的实验菌悬液离心管放在光源的正下方照射，其中每个浓度的离心管分别进行光处理2h、10h、24h、48h，光照前用磁力混合涡旋器进行混匀，以使粉体在菌液中保持分散状态，同时设置对照。
（5）光照后分别用移液枪从离心管里的菌悬液吸取100μL，滴加到上述的培养皿里进行涂布培养。
（6）将平板倒置于30℃的培养箱内培养2-3w。
（7）重复上述过程在两次作为平行实验。
1.2.4 平板培养法测试TiO2 对P. infestans的抗菌性
在无菌室操作台上进行TiO2粉末对P. infestans抗菌性测定，具体操作步骤如下：
（1）配制一定量的察氏固体培养基进行高压灭菌。
（2）在超净工作台里将灭过菌的察氏培养基倒入灭过菌的培养皿里，密封以备涂布用。
（3）在超净工作台里向培养皿里滴加0.2%、0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%辣个不同浓度的TiO2纳米粒子溶液100μL，用涂布棒均匀涂布，之后用枪头挑取相同的P. infestans的菌丝接种到培养皿里，并设置对照。
（4）将培养皿放到20℃的培养箱里，分别进行光处理2h、10h、24h、48h，之后再放入
20℃的培养箱里进行暗处理培养1w左右。
（5）经过培养后，进行对比并观察到浓度为0.2%、2%、2.5%的TiO2纳米粒子对菌落的
抑菌作用较明显而其它三个浓度的抑菌作用不明显。
（6）将浓度为0.2%、2%、2.5%的TiO2纳米粒子按上述步骤作用于P. infestans，培养观察，确定出哪个浓度的TiO2纳米粒子对P. infestans的抑菌作用最明显。
2．结果与分析
2.1 TiO2对酵母细胞抑菌作用的结果分析
由图2-A、B、C图可知在浓度为0.2%和处理相同时间下N/TiO2纳米粉末和Eu/TiO2纳米粉末的抑菌作用比单独的TiO2纳米粉末的抑菌效果较明显。在相同光催化剂处理不同时间，效果有所不同，在经过三个时间处理24h后的抑菌效果最好。N/Eu/TiO2抑菌作用没有达到预期的效果。
图2 TiO2纳米粉末和掺杂型TiO2纳米粉末对酵母细胞的抑菌作用
注：A为TiO2纳米粉末，B为N/TiO2纳米粉末，C为Eu/TiO2纳米粉末，D为N/Eu/TiO2纳米粉末
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