产醇脱氢酶埃切毕赤酵母的发酵优化及其催化 第10页

图4.5 N源浓度对生长及产酶的影响
由实验结果可知，随着氮源浓度的增加，OD和酶活都有上升，当氮源浓度为10g/L时，OD和酶活都达到最高，对菌体生长及酶活均比较高，之后继续增大氮源浓度，OD和酶活都有下降，综合比较选择氮源浓度为10g/L。
4.3金属离子优化
4.3.1 金属离子种类对生长及产酶的影响
基本发酵培养基成分（g/L）：25g/L的麦芽糖，20g/L的酵母膏，pH7.0。
在基本培养基基础上按1g/L的量分别添加金属离子：MgSO4•7H2O；无水CaCl2，MnSO4•H2O；ZnSO4•7H2O；FeSO4•7H2O；KCl；Na2HPO4•12H2O；NaH2PO4•2H2O。测定其发酵液终pH、OD值及酶活，并做一组平行试验，结果见如下表4.6。
表4.6 金属离子浓度对生长及产酶的影响
金属离子种类 OD值 总酶活(U/L) 比酶活(U/g)
空白 7.05 8.48 1.59
Mg2+ 7.19 7.60 1.39
Fe2+ 6.66 9.48 1.88
Zn2+ 4.115 10.71 3.42
Mn2+ 5.025 9.42 2.47
Ca2+ 8.035 7.54 1.27
 
图4.6 金属离子浓度对生长及产酶的影响
由实验结果可知，硫酸锌的比酶活和总酶活最好，所以锌离子时最好的金属离子。
4.3.2 Zn离子浓度对生长及产酶的影响
在基本培养基基础上分别添加不同浓度的ZnSO4•7H2O（g/L）：0.1，0.3，0.5，1.0，1.5，2.0。测定其发酵液终pH、OD值及酶活，并做一组平行试验，结果见如下表4.7。
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表4.7 Zn离子浓度对生长及产酶的影响

锌离子浓度（g/L） OD值 总酶活(U/L) 比酶活(U/g)
空白 8.89  9.65  1.43
0.002 7.91  19.06  3.18
0.005 8.09  19.46  3.17
0.01 7.88  22.00  3.68
0.02 7.68  19.74  3.39                                            
图4.7 锌离子浓度对生长及产酶的影响
由实验结果可知，随着硫酸锌浓度的增加，OD和酶活都有上升，当硫酸锌浓度为1.0g/L时，OD和酶活都达到最高，对菌体生长及酶活均比较高，之后继续增大硫酸锌浓度，OD和酶活都有下降，综合比较选择锌离子浓度为1.0g/L作为最佳金属离子。
4.4 初始pH值优化
4.4.1 最佳初始发酵pH值优化
基本发酵培养基成分（g/L）：葡萄糖15g/L，蛋白胨5g/L，酵母膏5g/L，K2HPO4 0.5g/L，KH2PO4 0.5g/L，NaCl 0.5g/L，MgSO4•7H2O 0.5g/L，30℃，180 rpm，培养48h调整初始发酵液pH值为3，4，5，6，7，8。测定其发酵液终pH、OD值及酶活，并做一组平行试验，结果见如下表4.9。

表4.8 pH值对生长及产酶的影响
初始pH  OD值 总酶活(U/L) 比酶活(U/g)
3 4.83  11.74  3.21
4 6.02  16.73  3.44
5 6.25  15.95  3.36
6 5.68  14.28  3.31
7 5.38  16.66  4.11
8 5.05  14.08  3.67

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