3.2.4 细胞干重的测定
取发酵液100mL在10000rpm下离心5min，弃上层清液。用生理盐水(0.80%)洗涤离心两次，置于60℃烘箱中烘干至恒重。
图3.1 细胞干重标准曲线
以测得的菌体干重计算出菌体浓度（dry cell weight g/L, DCW）。将同样的发酵液稀释不同倍数，并测定在600nm波长处的吸光度（OD600），并以OD600与对应的菌体浓度作图，由实验结果可知，吸光值与DCW具有良好的线性关系，y=0.3876x，R2=0.9993。
3.2.5 酶活测定方法
测定每次发酵液OD值，并根据OD-DCW公式，取一定量发酵液使最终干细胞重为15mg，离心（4℃，8000rpm，5min）弃上层清液，并以pH7的磷酸缓冲液洗涤离心（4℃，8000rpm，5min）2次。所得菌体加1ml含10%葡萄糖的磷酸缓冲液(0.2M，pH7.0)重新悬浮，培养45分钟之后加入20mM苯乙酮反应1h，加1ml甲醇，振荡摇匀，取出1ml离心（12000rpm，10min），取上清液用滤膜（0.22μm）过滤后HPLC分析。
一个总酶活单位定义为每分钟每升细胞催化产生的苯乙醇的微摩尔数；一个比酶活单位定义为每分钟每克细胞催化产生的苯乙醇的微摩尔数。
HPLC条件：流动相：甲醇:水=1:2；流速：1.0mL/min，C18柱，柱温：25℃。
3.2.6 标准曲线的绘制
图3.2 苯乙醇标准曲线
为了用高效液相色谱对反应过程进行跟踪及定量检测，有必要建立酶催化产物苯乙醇的标准曲线。本实验选择了苯乙醇不同含量，以产物与底物峰面积比-产物含量绘制出标准曲线，如下所示；后续实验取样检测反应进程样品的浓度均由峰面积对应标准曲线来得到。
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