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竹叶黄酮的提取及抗氧化活性研究 第6页

更新时间:2016-11-1:  来源:毕业论文
2. 实验材料与方法
2.1 实验材料与设备
2.1.1 主要实验仪器设备

表2.1 主要仪器设备一览表
仪器名称 型号 生产厂家
干燥箱 DHG-9123A 上海跃进医疗器械厂
粉碎机 DJ-2 上海淀久中药机械制造有限公司
数显恒温水浴锅 HH-S 金坛市岸头国瑞实验仪器厂
离心机 LXJ-IIB 金坛市岸头国瑞实验仪器厂
紫外可见分光光度计 722 上海菁华科技仪器有限公司
旋转蒸发器 RE-52A 上海亚荣生化仪器厂
 电子天平 AL104 梅特勒-托利多仪器有限公司
2.1.2 实验材料与试剂
表2.2 主要材料和试剂
  
2.2实验方法
2.2.1主要实验流程
   (1)竹叶的预处理过程
竹叶→采摘→清洗→剪碎→烘干→粉碎→脱脂脱色→烘干→备用
  本文来自辣$文)论'文`网,毕业论文 www.751com.cn 加7位QQ324~9114找原文 (2)竹叶黄酮粗提流程                                            
竹叶粉→加入乙醇→恒温水浴→分离固液→固体加入乙醇→恒温水浴小时→分离固液→固体加入乙醇→恒温水浴小时→分离固液→合并3次提取液→备用
   (3)竹叶黄酮的富集纯化流程
黄酮粗提液→旋转蒸发→脱脂脱色→氯仿洗涤→旋转蒸发→低温烘干→溶解重结晶→低温烘干→成品  
2.3实验内容
2.3.1标准曲线的绘制及回归方程的建立
使用芦丁标准试剂25mg,用体积分数80%乙醇溶解,并且完全移入100mL容量瓶中,用80%乙醇定容。分别取芦丁标准溶液0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00、12.00、14.00、16.00mL于9只50mL容量瓶中,加入质量分数5%的 1.5mL,摇匀,放置6min后加入质量分数10%的Al(NO3)31.5mL,6min后再加入质量分数4%的NaOH溶液20mL混匀,用水稀释至刻度,15min后以第一管为空白参比,采用比色法在510nm下测吸光度。对试验数据进行线性回归。

2.3.2单因素实验
本实验对竹叶黄酮的最佳提取条件进行了研究,选取对竹叶黄酮提取影响较大的几个因素包括乙醇浓度、固液比、温度、提取时间4项条件进行了研究探讨。
(1)乙醇浓度对提取效果的影响
乙醇浓度从10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%,共9个水平进行实验。
取9支大试管,分别加入0.5g竹叶粉,然后依次加入同体积不同浓度的乙醇,置于70℃的水浴中,恒温水浴1小时后取出上层液体离心过滤。滤液分别取出1mL,按照测标准曲线的方法添加试剂测定其吸光度。
(2)固液比对提取效果的影响
固液比分别为1:15、1:20、1:25、1:30、1:35、1:40、1:45、1:50,共8个水平进行实验。

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