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碎次茶中功能性成分茶多酚的提取和纯化+实验第7页

更新时间：2016-11-8: 来源：毕业论文

2.3离子沉淀法纯化茶多酚[15-17]
沉淀法原理：沉淀法根据茶多酚能与无机金属离子反应生成沉淀的特性来生产茶多酚。该法将茶叶用热水或乙醇溶液浸取过滤,调节滤液的pH值为碱性,在滤液中加入沉淀剂使茶多酚沉淀,沉淀用稀酸溶解后用乙酸乙酯萃取,得到含茶多酚的乙酸乙酯溶液,再经减压蒸馏浓缩、干燥得到茶多酚。
2.3.1实验材料与试剂
材料和仪器：
陈年茶叶自备；

仪器：
仪器名称                       型号                   公司
可见光分光光度计               722s        上海菁化科技仪器有限公司；
数显恒温水浴锅                 HH-4        上海森地科学仪器有限公司；
精密电子天平                   JA2003      上海恒平科学仪器有限公司；
电冰箱                         BCD-245     西门子有限公司；

试剂：铰链板自动送料系统设计+CAD图纸+光电控制+气动送料
试剂名称           规格型号      单   位               购自
硫酸亚铁,七水      CP（沪试）     500g       国药集团化学试剂有限公司；
磷酸氢二钠，十二水 CP（沪试）     500g       国药集团化学试剂有限公司；
磷酸二氢钾         CP（沪试）      500g       国药集团化学试剂有限公司；
酒石酸亚铁，四水   CP（沪试）     500g       国药集团化学试剂有限公司；
乙酸乙酯           AR（沪试）     500ml      国药集团化学试剂有限公司；
氯化铝，无水       AR（沪试）    100g       国药集团化学试剂有限公司；
浓硫酸                98%        500ml      国药集团化学试剂有限公司；
固体氢氧化钠       AR（沪试）    500g       国药集团化学试剂有限公司；
2.3.2实验方法
1）称取20g茶叶粉→浸提，浸提液待用→取100ml浸提液，称取5g氯化铝加入浸提液→氢氧化钠溶液调节pH至8→产生沉淀，1h→过滤→滤饼用40%硫酸溶液溶解→乙酸乙酯萃取酸水层→取上层有几层浓缩干燥→茶多酚粗样品
2）浸提方法采用冰融-水浴法即用10倍水量在60℃下浸提3次，每次浸提时间为50min来浸提茶多酚。浸提液冷藏备用。
1）茶多酚理论含量计算
酒石酸亚铁溶液：1.0g硫酸亚铁和5.0g酒石酸钾钠，水溶解并定容至1L（低温保存10天有效）。
磷酸盐缓冲液：称取23.9g十二水磷酸氢二钠，加水溶解，定容至1L；称取9.08g磷酸二氢钾，加水溶解，定容至1l；去上述两种溶液分别85ml和15ml混合均匀。
准确吸取试液1ml，注入25ml容量瓶中，加入4ml水和5ml酒石酸亚铁溶液，混合均匀，再加入磷酸盐缓冲液至刻度，在波长540nm处，以空白溶液作参比，测定吸光度。

式中：L1——试液的总量，ml；
      L2——测定时的用液量，ml；
      M0——试样的质量，g；
      m——试样干物质含量，%；
      A——试样的吸光度；
2.4离子交换柱层析法[18-19]
离子交换柱层析法是利用不同树脂对茶多酚和咖啡碱的不同吸附性能来分离制备茶多酚。本实验选用的是聚酰胺和阴离子交换树脂，以乙醇作为洗脱剂，洗脱分离茶多酚。