2.3 漆酶的纯化度和回收率
表3.粗毛栓菌漆酶的纯化度和结果
Summary of the purification of laccase in Trametes gallica
总酶活(U) 总蛋白(mg) 比活力(U/mg) 回收率% 纯化度
Total activity Total protein Specific activity Recovery rate Purification degree
粗酶液 17012.1 34.8 488.9 100 1
Crude enzyme
阴离子交换层1939.4 0.8 2448.7 11.4 5.0
Sepharose-Q fast flow
2.4 讨论
离子交换层析后,漆酶的回收率为11.4%,纯化度为5.01。通过与其他人的实验结果(经过硫酸铵分级盐析、DEAE cellulose离子交换层析、Sephacryl TM S2200柱层析,从白腐菌株Phellinus sp. SYBC2L2所产的漆酶中纯化得到电泳纯漆酶Lac3,其纯化倍数为28. 27,回收率为14. 76%[13])比较,得出如下结论:1)未经活性电泳纯化,其漆酶的纯化倍数不高;2)在实验操作过程中,漆酶过多流失,致使回收率不高。分析可能原因:Q-Sepharose循环回收使用次数过多,致使离子交换性能下降。
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致谢
在2010年4月1日至2010年5月30日期间,我在菏泽学院生命科学系做毕业论文时,有幸在孙迅教授的指导下完成了论文中有关粗毛栓菌漆酶分离纯化的试验。本论文是在孙迅博士的认真指导下完成,在此,谨向他表示诚挚感谢。
感谢实验室的杨雪、刘于蓝,殷欣等同学,在毕业设计阶段,大家的互相帮助,相互关心,相互学习,使我们有了一个很好的学习氛围和实验环境,得以顺利完成这次毕业论文的实验,谢谢大家!