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粗毛栓菌木聚糖酶cDNA的RT-PCR扩增+开题报告 第2页

更新时间:2011-4-27:  来源:毕业论文
粗毛栓菌木聚糖酶cDNA的RT-PCR扩增+开题报告 第2页
目  录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 主要仪器、试剂与材料2
1.1 主要仪器、试剂 2
1.2 材料 2
2 方法3
2.1 菌种的培养3
2.1.1 培养基的配置3
2.1.2 菌种的接种3
2.2 RNA的提取3
2.2.1 实验前的准备4
2.2.2 提取RNA4
2.3 总RNA的纯度与浓度的测定4
2.4 总RNA的甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测4
2.5 RT-PCR5
2.5.1 RT-PCR过程5
2.5.2 PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳5
3 结果与分析 5
3.1 总RNA电泳结果5
3.2 总RNA纯度与浓度的检测结果6
3.3 木聚糖酶cDNA的PCR扩增结果6
4 讨论 7
4.1 总RNA电泳结果7
4.2 PCR扩增结果7
4.3 试验中注意事项7
5 结束语 7
参考文献7
致谢8
粗毛栓菌木聚糖酶cDNA的RT-PCR扩增
生物科学专业学生     刘乾峰
指导教师       孙迅
摘要:  本实验以半纤文素作碳源培养粗毛栓菌12d,收集菌丝体,提取总RNA,做RT-PCR,扩增出两条木聚糖酶cDNA片段。
关键词:  粗毛栓菌;木聚糖酶cDNA;RT-PCR
PCR Amplification of Xylanase cDNA in Trametesec gallica
Student majoring in Biology   Liu Qian-feng
     Tutor            Sun Xun
Abstract  Total RNA was extracted from Trametes gallica Fr. cailtiated for 12 days in hemicellulose  medium. RT-PCR was carried out at tow cDNA fragments were amplified. Key words  Trametes gallica;xylanase cDNA;RT-PCR
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木聚糖是存在于自然界中的丰富再生资源之一, 木聚糖酶是指能专一降解半纤文素木聚糖为低聚木糖和木糖的一组酶的总称, 主要包括三类:1) β-1,4-D-内切木聚糖酶, 从木聚糖主链的内部切割β-1,4糖苷键, 使木聚糖溶液的粘度迅速降低; 2) β-1,4-D-外切木聚糖酶, 以单个木糖为切割单位作用于木聚糖的非还原性末端, 使反应体系的还原性不断增加; 3) β-木糖苷酶, 切割低聚木糖和木二糖, 有助于木聚糖彻底降解为木糖[10]。木聚糖酶在饲料、食品、造纸、纺织和能源等工业中显示出广阔的应用前景, 其中一个较重要的用途是作为饲料添加剂应用于饲料行业。由于我国耕地面积日益减少以及畜、禽养殖业的快速发展, 加剧了人畜争粮的矛盾, 因此, 提高饲料的利用率就显得尤其重要。大量实验证明, 饲料中含有的木聚糖等非淀粉多糖, 不能被单胃动物消化, 并增加了食物的粘稠度, 阻碍营养物质(脂肪和蛋白质等)的消化, 故木聚糖被称为“抗营养因子”之一[8]。木聚糖酶能有效降解木聚糖, 使肠内食物的粘度降低; 能破坏植物细胞壁, 有利于其它营养成分的释放; 能提高内源性消化酶的活性, 促进养分的消化, 从而减少排泄物和环境的污染; 酶水解产物低聚木糖和木糖能增加肠道内有益菌的数量, 降低畜禽的腹泻率等[9]。本研究主要是扩增木聚糖酶的cDNA片段。

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