生物工程专业学生 孙秋谨
指导教师 孙迅
摘要：利用愈创木酚作为显色剂，做活性-聚丙烯酰胺凝胶电泳，至少检测出粗毛栓菌一种漆酶同工酶组分。
关键词： 粗毛栓菌, 漆酶, 酶谱分析
Zymogram analysis of laccase in Trametes gallica Fr.
Student majoring in Biotechnological engineering Sun Qiujin
Tutor Sun Xun
Abstract： At least One laccase isoenzyme in Trametes gallica was detected out by native-polyacrylamide gel electrophoresis.
Key words: Trametes gallica,laccase,zymogram analysis
引言
木质素是第二天然聚合物,木质素的降解是碳素循环中的关键一步[9]。自然界中木质素的降解主要是通过丝状真菌,尤其是白腐真菌（white-rot fungi）的分解作用来完成的[2]。除纤文素酶和半纤文素酶之外，白腐真菌还能够产生两种胞外过氧化物酶，即木质素过氧化物酶（lignin peroxidase，LiP）[10]和锰过氧化物酶（manganese-dependent 原文请找腾讯752018766辣,文-论'文.网http://www.751com.cn/ ），许多白腐真菌还同时产生一种含铜的酚氧化酶（copper-containing phenol oxidase）即漆酶（laccase）[2]。漆酶按其主要来源分为漆树漆酶和真菌漆酶两大类,研究表明,漆酶可作用的底物范围广泛。 粗毛栓菌是一种降解木质纤文素能力强，产木质纤文素降解酶酶系齐全的白腐担子菌，在我国广泛分布，主要生长于杨木上，是杨木的主要生物降解者。实验表明该菌也能生长于农作物秸杆上，如在麦草上生长60天后，能够消耗麦草中66%的纤文素，72%的半纤文素和70%的木质素，说明该菌具有很强的降解木质纤文素的能力[2]。所以进一步研究和分析T. gallica产木质纤文素降解酶尤其是产生木质素降解酶活力发酵条件是很有必要的。本论文工作的一项重要内容是研究粗毛栓菌野生菌株产生漆酶的培养方法以及酶谱分析，以便为将来有效的克隆编码这些酶类的基因奠定必要的工作基础[2]。众所周知，酶谱技术是用来鉴别酶的种类、分析酶系组成和检验酶活性的实验技术。活性-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术常用来进行酶的检测和定位。利用愈创木酚作为显色剂，对粗毛栓菌的漆酶酶谱进行初步分析[4]。
1 材料与方法
1.1 菌株
白腐担子菌系孙迅于1997年8月在山东省菏泽市北郊的护城堤上，从被砍伐的杨树上分离得到的。该野生菌株于同年经由山东省科学院生物研究所微生物分类室的马启明先生对其进行了初步鉴定，定为Trametesg allica Fr[2]。