粗毛栓菌漆酶的初步分离与纯化
问1：对于这个论文题目，你是怎么认识的？
答：对于这个题目，纵观整个论文设计，主要涉及漆酶的分离提纯这一实验过程。它所包括的实验过程和实验方法对于我所学的专业知识的掌握和实验技能的运用是一个很好的考察。有人说一个设计一般都会得出一个结论或着证明一个结论，而这个题目是乎很难总结出一个这样的结论。我认为这种看法有偏见，在我看来这个实验能成功的分离出具有漆酶活性的组分，这本身就是一种结论。同时它还为后续的对于漆酶活性的细致分析奠定了基础。所以我认为这个题目不失为一个好的毕业论文题目。以上这些就是我对这个论文题目的看法和认识。
问2：你为什么选用分光光度法来测定漆酶的活力，而不是其他的一些更为知名的更加权威的方法呢？
答：选用此法是根据这个实验的性质和目标，综合考虑后决定的。这个实验的主要目标是分离出具有漆酶活力的组分，以期对后续实验提供条件和基础，对该组分进行活力测定也是基于这种目的。分光光度法是一种简便、快捷、准确而且通用的方法。
一、立题依据(国内外研究进展或选题背景、研究意义等)
漆酶（Laccase, EC 1.10.3.2）是一种含铜离子的多酚氧化酶，最早发现于日本紫胶漆树
Rhus vernicifera 的浸出液中，现已证实一些高等真菌(主要是白腐真菌)也能分泌漆酶。白腐真菌是生物圈中木质素、纤文素和半纤文素的重要降解者，其分泌的漆酶在木质素降解过程中起着重要作用。漆酶可与多种底物作用，在有机合成、生物检测、免疫检测、有毒化合物的消除、生物传感器制作、制浆造纸废水处理、纸浆生物漂白和饮料加工、食药用菌生产、食品分子交联、植物食品保护等方面具有广阔的应用前景和潜在应用价值。多年来，已对漆酶及其产生菌进行了广泛研究，内容涉及菌株生长特性、漆酶的合成调控、酶的分离纯化和酶学性质等多个方面。现已有近百种不同来源的漆酶被分离纯化并进行了酶学性质研究，一些漆酶基因已被克隆测序，有的还在酵母等真核生物内实现异源表达，但选育新的漆酶产生菌，优化其产酶条件仍是提高漆酶产量的一条重要途径和今后一段时期内研究的热点。
本研究所用粗毛栓菌Trametes gallica Fr. 是一种能够分泌漆酶的白腐真菌，可降解麦草木质纤文素。
二、研究的主要内容及预期目标
1、本文主要测定了粗毛栓菌在一种以麦草粉为诱导物的培养液中的产漆酶情况，并对酶的一些基本性质进行了研究，以便为其在生产中的应用提供理论依据。
2、对粗毛栓菌产漆酶的诱导、酶的分离纯化及其部分性质进行初步研究。
3、对粗毛栓菌漆酶进行纯化, 并对性质进行探讨, 以便为木质素的降解的研究提供一定的科学依据, 同时为在造纸工业和环保工业上的应用提供一定的理论依据。
三、研究方案（思路）
1、产酶培养基的制备。
2、浸提漆酶。原文请找腾讯752018766辣,文-论'文.网http://www.751com.cn
3、对提取的粗酶进行超滤浓缩。
4、对粗菌液盐析、除去盐离子。
5、透析：除去其他大分子物质。
6、离子交换柱层析：收集有酶活力的部分。
7、测定收集的酶的活力。
四、论文进度安排
1、3月25日，产酶培养基的制备。
2、4月26日，粗酶液的浸提。
3、4月27日，对粗酶液的超滤浓缩。
4、4月29日，盐析。
5、4月30日，透析。
6、5月1日，离子交换柱对漆酶的柱层析。
7、5月4日，漆酶活性测定。 1838