摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1材料 2
1.1.1菌种2
1.1.2主要仪器2
1.1.3主要试剂2
1.1.4 PDA培养基2
1.1.5高产漆酶液体培养基 2
1.2方法 2
1.2.1粗酶的制作2
1.2.2 粗酶的超虑浓缩3
1.2.3 硫酸铵盐析3
1.2.4透析3
1.2.5 离子交换柱层析3
1.2.6 酶活力的测定3
1.2.7蛋白含量的测定3
2 分析和讨论3
2.1漆酶的诱导3
2.2 离子交换层析对漆酶的分离与纯化3
2.2.1表1.洗脱组分漆酶活力测定结果4
2.2.2 图1.粗毛栓菌漆酶的Q-Sepharose柱层析洗脱曲线4
2.3 蛋白质含量标准曲线4
2.3.1 表2.牛血清蛋白浓度与光密度值的关系4
2.3.2 图2.蛋白质含量标准曲线4
2.4 表3.粗毛栓菌漆酶的柱层析纯化结果 5
参考文献5
致谢6
粗毛栓菌漆酶的初步分离与纯化 第2页
生物工程专业学生 殷欣
指导教师 孙迅
摘要 将粗毛栓菌接种在含有麦草粉的培养基中培养25d，浸提得粗酶液，尔后经超滤浓缩、盐析和透析，将透析液上样于Q-Sepharose F. F.层析柱，获得具有漆酶活性的组分。
关键词 粗毛栓菌，漆酶，离子交换层析
Seperation and Purification of Laccases in Trametes gallica Fr.
Student majoring in biology Yin Xin
Tutor Sun Xun
Abstract Trametes gallica Fr. was cultivated in wheat straw powder for 25 days. The crude enzyme was ultrafiltrated, salted out, dialyzed原文请找腾讯752018766辣,文-论'文.网http://www.751com.cn to Q-Sepharose FF ion exchage column. The effluent with laccase acticity was obtained.
Key words Trametes gallica, laccase, ion exchage chromatography
引言
许多微生物可对木质素进行不同程度的降解，其中，白腐真菌（white-rot fungi）最为有效[11,12]。除纤文素酶和半纤文素酶之外，白腐真菌还能够产生两种胞外过氧化物酶，即木质素过氧化物酶（lignin peroxidase，LiP）[13,14]和锰过氧化物酶（manganese-dependent peroxidase, MnP）[15]，许多白腐真菌还同时产生一种含铜的酚氧化酶（copper-containing phenol oxidase）即漆酶（laccase）。
漆酶是一种含铜的多酚氧化酶，最早是从日本的漆树汁中发现的，是人类最早发现的酶之一，但直到现在，人们对它的认识还不完整[2]。近年来，随着漆酶功能的逐步发现，有关漆酶的研究受到普遍的重视。由于在降解木质素方面的功能，使之在制浆造纸工业，特别是纸浆生物漂白领域得到深入的研究和开发[3,4]，在环保方面也有很大的潜力[5]，漆酶可与有毒的酚类作用，使含苯氧基类的除草剂、石油化工废物的物质解去毒性等[6]。
随着应用的不断加深，漆酶的研究和开发越来越受到人们的关注。本文就以漆酶的分离、纯化进行初步研究。