2.1 仪器及试药
2.1.1 仪器
①紫外可见分光光度计(日本岛津SHIMADZU,型号：UV-2550 )
②恒温水浴箱 （型号：优莱博SOP E-JULABO EU-5A）
③德国Lab daucer 振动仪（型号：S25）
④秒表（上海星钻秒表有限公司，型号SCM 2-2010-07-074-0067）
⑤电子天平（Sartorius,型号：CP225D）
⑥移液枪（eppendoff Research,规格：10-100 ，100-1000 ，500-5000 ）
2.1.2试剂
⑴标准样品：日本ELENTAL（爱伦多）氨基酸型肠内营养剂（日本味之素）
样品批号：2010A06376，2010A06377，2010A06378
⑵对照品：重酒石酸胆碱: 日本ELENTAL（爱伦多）批号：035
⑶市售日本东京测定胆碱酯酶用的测试盒：
名称:日本ELENTAL（爱伦多）胆碱酯酶用测试盒
批号:035毕业论文
http://www.751com.cn/ 试剂盒内包括: 基质液7ml*1 , 缓冲液125 ml*1，反应停止液 125 ml*1，
反应试液 20ml*6(COD 4-AAP)，标准液 5 ml*1，
⑷五氧化二磷(干燥至恒重)
厂家：国药集团化学试剂有限公司
批号：20090109
⑸水（MiliQ去离子水）
2.2实验方法
2.2.1胆碱的定量方法
2.2.1.1原试验方法[15]原文请+QQ324,9114辣.文^论,文'网
精密称量约10g标准样品「日本ELENTAL（爱伦多）氨基酸型肠内营养剂（日本味之素）」(供试品)，在约100ml水中溶解，加入碘试液至微显色，再加入0.5ml碘试液。静置5分钟，加水至约200ml，混匀，在加热板上加热30分钟。冷却至室温，加水定容至500ml。用微孔滤膜（孔径0.45μm）过滤，滤液作为供试品溶液。
准确称量约0.2g干燥后的重酒石酸胆碱「日本ELENTAL（爱伦多）批号：035」（对照品）,加水溶解，定容至200ml。取该溶液2ml，稀释定容至100ml作为对照品标准溶液。
准确称取供试品溶液，对照品标准溶液及水各2ml分别至于3个100ml容量瓶，各加入胆碱A酶试剂2ml，用水定容，振摇混合（使用德国Lab daucer 振动仪）约3秒，立即用500nm波长对上述溶液进行吸光度测定，测定吸光度AT1，AS1及AB1。然后将上述溶液置于37℃的水浴中23分钟，再用吸光度测定法，在波长为500nm处测定吸光度AT2，AS2，及AB2。
本品100g中胆碱（C5H15NO2）的量（mg）
=定量用重酒石酸胆碱的量（mg）×[（AT2- AT1）-（AB2- AB1）]/[（AS2- AS1）-（AB2- AB1）]×0.4785/20×100/供试品取样量（g）
2.2.1.2现拟定方法
精密称量约10g标准样品「日本ELENTAL（爱伦多）氨基酸型肠内营养剂（日本味之素）」(供试品)，400mL温水中溶解，静置30分钟，冷却，加水定容至500mL，用0.45μm孔径的微孔滤膜过滤,滤液作为供试品溶液。
准确称量约0.2g干燥后的重酒石酸胆碱「日本ELENTAL（爱伦多）批号：035」（对照品）,加水溶解，定容至200ml。取该溶液2ml，稀释定容至100ml作为对照品标准溶液。
准确称取供试品溶液，对照品标准溶液及水各2ml分别至于3个100ml容量瓶，各加入胆碱B酶试剂2ml，用水定容,振摇混合（使用德国Lab daucer 振动仪）约3秒，立即用500nm波长对上述溶液进行吸光度测定，测定吸光度AT1，AS1及AB1。然后将上述溶液置于37℃的水浴中23分钟，再用吸光度测定法，在波长为500nm处测定吸光度AT2，AS2，及AB2。
本品100g中胆碱（C5H15NO2）的量（mg）
=定量用重酒石酸胆碱的量（mg）×0.4785×[（AT2- AT1）-（AB2- AB1）]/[（AS2- AS1）-（AB2- AB1）]×1/20×100/供试品的量（g）
3 结果与讨论毕业论文
http://www.751com.cn/3.1方法学验证
3.1.1标准曲线的绘制
精密称取对照品0.10121g定容到200ml容量瓶（浓度506.05 ），分别加入0.125、0.25、0.50、1.00、2.00、2.50，5.00，10.00，20.00，25.00 ml，分别至100ml容量瓶中，按方法2.2.1.2测定，绘成标准曲线，结果见表3-1，图3-1。对胆碱浓度及吸光度作图，见图3.1，对照品浓度在 2.5～12.7 时，对照品浓度与吸光度成良好线性关系，当对照品浓度大于12 时，样品过滤后不清，滤液中有乳光，平行测定,吸光度值差异较大，对实验结果有较大误差影响。
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