【现拟定试验方法】
取样品(10g)
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在400mL温水中溶解
↓
放置30分钟
↓
加水定容至500mL
↓
滤过(微孔滤膜)
在原试验方法中,过氧化氢被副反应消耗,需采用加碘并煮沸的方法消除影响。而在现拟定方法中,胆碱与胆碱氧化酶(B)作用后生成过氧化氢,在过氧化氢作用下,苯酚与4-氨基比林氧化性缩合,生成红色的琨色素。研究结果表明,现拟定方法中还原物质对试验结果基本上无影响,所以变更供试品溶液的制备方法可行。
3.2.2 对照品标准溶液制备方法的变更
对照品标准溶液制备方法的变更点概述如下。
【原试验方法】
定量用重酒石酸胆碱0.2g
(干燥)
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加水定容至200ml
↓
稀释:×2/100ml(水)
【现拟定试验方法】
定量用重酒石酸胆碱0.2g
(减压,氧化磷(V),干燥4小时)
↓
加水定容至200mL
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稀释:×2/100mL(水)
3.2.3测定条件的变更
测定条件的变更点概述如下。
【原试验方法】
测定胆碱用的酶试液:股份公司ヤトロン制的イアトロ-MA701(国内暂无中文名)此实验中暂命名为胆碱A酶试剂
【现拟定试验方法】
测定胆碱用的酶试液:股份公司カイノス制的CHEカイノス(国内暂无中文名)此实验中暂命名为胆碱B酶试剂
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