实验仪器
表2-2 主要设备及其生产厂家
仪器名称 型号 厂家
PCR仪 5333 Eppendorf
电热恒温鼓风干燥箱 DHG-9240A 上海恒科
电泳仪 EPS300 Tanon
凝胶成像仪 1600 Tanon
电子天平 TE412-L Sartorius
超速离心机 Centrituge 5424 Eppendorf
电热恒温水浴锅 DK-S11 上海森信
电热恒温培养箱 DRP-9052 上海森信
恒温摇床 TCYQ 太仓市实验设备厂
蒸汽灭菌器 G154DW Zealway
刨冰机 YN-168 上海因纽特
恒温金属浴 R1 深圳华因康
冷冻离心机 Centrifuge 5804R Eppendorf
超净工作台 SW-CJX-1F 苏州汇通
2.2实验方法
2.2.1实验流程示意图
图2-2 实验流程示意图
2.2.2基因组DNA的提取
采集收取正常人的血液和癌症患者石蜡包埋组织的样品，编号提取基因组 DNA 备用。具体操作方法如下所示：
2.2.2.1正常基因组DNA的提取
标准抽提步骤：
①. 加500 μL Buffer AP1到1.5 mL离心管中；
②. 加250 μL抗凝全血到Buffer AP1中，用移液器来回吸注几次，以彻底溶解残留在吸头上的血液。盖紧离心管盖子，旋涡振荡10s；
③. 加100 μL Buffer AP2，旋涡振荡10 s；12,000×g 离心10 min；
④. 制备管置于2 mL离心管，将步骤③的滤液加入到制备管中，12,000×g离心 1 min；
⑤. 弃滤液，将制备管置回原2 mL离心管中，加700 μL已加无水乙醇的Buffer W1A，室温放置2 min，12,000×g离心30 s；原文请+QQ324,9114辣.文^论,文'网
⑥. 弃滤液，将制备管置回到原2 mL离心管中，加800 μL已加无水乙醇的 Buffer W2，12,000×g 离心 1 min；
⑦. 将制备管置回2 mL 离心管，加500 μL Buffer W2 到制备管，12,000×g 离心1 min。
⑧. 弃滤液，将制备管置回原2 mL离心管，12,000×g 离心 1 min；
⑨. 将制备管置于另一洁净的1.5 mL 离心管中，在制备管膜中央加200 μL 70℃预热的Buffer TE，室温静置 1 min。12,000×g 离心 1 min 洗脱基因组 DNA。
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ARMS-PCR 快速检测 p53 基因外显子突变热点的快速鉴定 第5页下载如图片无法显示或论文不完整，请联系qq752018766
