药养胃散对大鼠胃肠粘膜中的前列腺素生长抑素胃动素含量影响
参考文献：
［1］ 潘国宗.现代胃肠病学［M］.北京：科学出版社，1994.34
［2］ Christofides N D. Motilin［M］.ln:Gut hormones.2nd Edition.London:Churchill Livingstone, 1981.273
［3］ Nillson B I. Relationship between interdige stive gallbladder emptying, plasma motilin and migrating motor complex in man［J］.Acta physiol-scand,1990,139(1):55
［4］ Lewin M J M.Somatostatin receptors［J］.Scand J Gastroenterology,1986,21(Suppl 119):42
我们以健脾、益气、养胃、活血化瘀为原则组成养胃散方，用于治疗慢性胃炎、消化性溃疡等常见的胃肠疾病，临床用药已10余年时间，收到了良好的治疗效果。为了从胃肠激素方面阐明养胃散在保护粘膜屏障方面的功能，从分子生物学方面论阐述养胃散的治疗机理。我们以大白鼠为实验动物，测定养胃散灌胃后，胃肠粘膜中前列腺素(PG)、生长抑素(SS)、胃动素(MTL)的含量。
1 实验材料
1.1 实验动物 选用SD大白鼠，由第一军医大学动物实验中心提供。共30只，雌雄各半，体重120～240g/只。
1.2 实验用药及剂量 实验用单味中药购于广东省药材公司。养胃散的处方为：干姜2g、丹参10g、党参10g、石斛10g、炙甘草3g、九里香10g、山楂6g，各药用水浸泡后，加水煎至50mL。消炎痛的用药剂量按标准动物等效剂量折算法，计算出大白鼠用量，即每100g体重用中药养胃散1mL，消炎痛0.02 mg。
1.3 PG、SS、MTL标准放免药盒 PG、SS、MTL各标准药盒分别购于：北京东亚放免技术探究所，海军放免技术中心和解放军总医院科技开发中心放免所。
2 实验方法
2.1 动物分组及各组处理方法
实验用30只大鼠禁食12h，按体重随机分为3组，分别为养胃散(消炎痛加养胃散组)，消炎痛组(消炎痛损伤组)和空白对照组。每组10只。
养胃散组：按规定剂量给予消炎痛灌胃，每日2次，共2d；第3天起给予养胃散灌胃，每日2次，共10d。
消炎痛组：按中药组相同方法和剂量给予消炎痛，第3天起给予等剂量的生理盐水灌胃，每日2次，共10d。
空白对照组：给予相同剂量的生理盐水灌胃，每日2次，共12d。
2.2 标本采集
实验结束后，禁食12h，处死，立即剖腹，分别留取胃粘膜(胃窦部)、十二指肠末段粘膜各约0.5 cm×0.5 cm，立即置于液氮内冻存备用。
2.3 PG、SS、MTL测定及计算方法
PG：取胃窦粘膜称量后，置于微型匀浆器中，加无水乙醇 0.1 mL研磨，再加生理盐水0.9 mL，充分研磨制成匀浆，测前4℃离心(3 500r/min，15min)，取上清液。以B/T(标准管计数/总计数)计算NSB(非特异性结合率)、S0(标准对照)。结合百分率，以B/B0即(标准管计数-空白管计数)/(零标准管计数-零空白管计数)计算标准及待测样品结合百分率，绘制标准曲线查出样品值。
SS、MTL标本处理方法相同，计算方法同PG。即取十二指肠粘膜标本称量后，加生理盐水1～2mL置于水浴锅中煮沸3min，冷却后加1mol/L冰醋酸0.5 mL，于匀浆器中制成匀浆，再用1mol/L的NaOH 0.5 mL中和，离心(3000r/min、30min)取上清液。
2.4 统计学方法 数据以(±s)表示，组间均数差异采用t检验。
3 结果
各组胃肠激素测定结果见表1。消炎痛大幅度地降低了粘膜内 PG(P＜0.001)、生长抑素(P＜0.05)、胃动素(P＜0.01)的含量。中药养胃散则可对抗之，使其分泌增多。
表1 各组胃肠激素测定结果(±s)
ρPG/(ng·L-1) ρSS/(ng·L-1) ρMTL/(ng·L-1)
养胃散 249.42±89.35 2.02±0.83 98.82±29.31
消炎痛 28.81±5.63*** 1.79±0.23* 37.68±12.5**
空白对照组 197.2±38.4 2.96±0.87 124.0±45.2
*和空白对照组比P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001
4 讨论
胃粘膜是PG主要合成场所之一，Robert报告了PG可以抑制胃酸分泌，减轻由消炎痛等刺激物质引起的粘膜损伤，并观察到受损伤的粘膜1h后即有迁移的上皮覆盖［1］。因此，前列腺素能削弱攻击因子对粘膜的损伤，达到保护粘膜屏障的功能。SS存在于胃粘膜的D细胞中，以胃窦和胃体部分含量最高，可视为胃粘膜的一种局部防御因子，其功能机理可能是SS和其受体结合，抑制腺苷酸活化酶的活性，降低了细胞内cAMP浓度；SS能抑制胃酸分泌和可以致肥大细胞释放组织胺［2］。李铁等人发现，SS能防止损伤细胞内基含量的减少和GSH-过氧化酶活性的降低，提高细胞清除自由基的能力。MTL主要由十二指肠远端及空肠粘膜中M细胞分泌，是一种肽类激素，主要功能是影响胃及肠道的动力，和消化间期综合肌电(interdigestive myoelectric complex,IMC)密切相关，具有肠道“清道夫”的功效。还能刺激胃蛋白酶、胰液的分泌，有助于食物消化［3，4］。
养胃散具有健脾、养胃、补中、益气功效，临床疗效显著。但从更深入的分子生物学角度了解甚少，为探索养胃散的治疗功能和胃肠激素方面的内在联系，我们设计了本实验。实验证实消炎痛口服后，不同程度地降低了粘膜中PG、SS、MTL的含量，而养胃散能对抗消炎痛的这种功能，增强了粘膜屏障功能，因此，对损伤的粘膜起到了重要的保护功能，这可能是养胃散能明显改善腹痛、腹胀、增进食欲的内在机理之一。
养胃散为复方制剂，其功能机理可能是多方面的，除本组观察到的和胃肠道的激素关系外，其他方面的功能有待进一步探究。
论文摘要：目的：从生物分子学方面探索养胃散的治疗机理，观察用药后胃肠粘膜中前列腺素(PG)、生长抑素(SS)、胃动素(MTL)的变化规律。方法：SD大白鼠为实验动物，消炎痛损伤胃粘膜后，再给予中药养胃散10d，用放射免疫法测定胃、肠粘膜中的PG、SS、MTL的变化规律。结果：养胃散能明显增加消炎痛损伤后的胃肠粘膜中的PG(249.42±89.35 ng·L-1)、SS(2.02±0.83 ng·L-1)、MTL(98.82±29.31 ng·L-1)的含量，和消炎痛组相比有显著性差异(P＜0.01)。结论：中药养胃散能增加胃肠粘膜内PG、SS、MTL的分泌，是其增强胃粘膜屏障功能的机理之一。
Effects of Yangwei Powder on Prostaglandin, Somatostatin and
Motilin Content in Rat Gastrointestinal Mucosa
Abstract:Yangwei Powder is an effective formula for chronic gastritis and peptic ulcer. To explore its therapeutic mechanism at the level of molecular biology, the contents of prostaglandin (PG), somatostatin (SS) and motilin (MTL) in rat gastrointestinal mucosa were detected by radioimmunoassay. Thirty SD rats were allocated to three groups: normal control group (n=10), indomethacin group (n=10) and Yangwei Powder group (n=10). Rat model with gastrointestinal mucosal injury was induced by administration of indomethacin for 2 days. Yangwei%26amp; nbsp;Powder was given for 10 days after the establishment of rat model. The results showed that Yangwei Powder significantly increased the contents of PG (249.42±89.35?ng·L-1), SS(2.02±0.83?ng·L-1) and MTL (98.82±29.31?ng·L-1), the differences being significant (P＜0.01) as compared with indomethacin group. It is indicated that increase of PG, SS and MTL secretion may be one of the mechanisms of Yangwei Powder for the improvement of barrier action of gastrointestinal musoca.
Key words: GASTRIC MUCOSA/drug effects; @ YANGWEI POWDER/ther. use;GASTROINTESTINAL HORMONES/analysis； RATS