资料与方法
1 实验动物本文来自辣.文,论-文·网原文请找腾讯32,49114
健康雄性普通级大鼠24只，7~9周龄，体重240～310g(由郑州大学实验动物中心所提供)。于郑州大学第五附属医院动物实验中心饲养，饲养温度21~28度，相对湿度59-65%，自然光予以照明。随机分为以下三组：对照组、ARDS组、ω-3 PUFA组。每组各6只大鼠，对照组、ARDS组食用普通饲料，ARDS组、ω-3 PUFA组除普通饲料补给外，于ARDS造模前10天，每日将ω-3多不饱和脂肪酸乙酯型胶囊内营养素按0.8g/kg体重的比例加入大鼠饲料中，即体重200 g大鼠营养素的用量为0.16g/只。
2 大鼠ARDS的模型制作及分组
饲养大鼠10天后，参照参考文献[7-8] 的方法，严格制作ALI/ARDS大鼠的动物模型。24只大鼠随机分为对照组、ARDS组、ω-3 PUFA组，共三组，每组各8只。术前禁食12h后，对照组、ARDS组、ω-3 PUFA组用20%乌拉坦1g.kg-1经腹腔注射麻醉后，ARDS组、ω-3 PUFA组向大鼠尾静脉注入油酸0.1ml.kg-1，对照组向大鼠尾静脉注入0.9%的无菌生理盐水0.1ml.kg-1。
3 主要试剂及仪器
3.1 主要试剂
java利用get与put成员函数完成文件的拷贝工作 ω-3多不饱和脂肪酸乙酯型胶囊（0．5 g／粒，北京百慧生化制药公司；其含二十二碳辣烯酸(docosahexaenoic acid，DHA)比例45％，二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid，EPA)比例35％），油酸500ml/瓶(郑州市超安化工技术有限公司)，乌拉坦（上海恒远生物科技有限公司），肺泡表面活性物质SP-A、肿瘤坏死因子-α（TNF-ɑ)、白细胞介素-6（IL-6）的ELISA试剂盒购于上海生工生物工程股份有限公司，NF-κb免疫组化试剂盒购于北京宝赛生物技术有限公司；焦碳酸二乙酯（DEPC）购于海门市碧云天生物技术公司。
3.2 主要仪器
超洁净工作台（苏州博亦实业有限公司医疗设备厂），OLYMPAS BX 43显微镜，德国BS220S14电子天平，-70℃超低温冰箱(三洋MDF-U33V)，HMIAS-2003W高清晰病理图文分析系统，YT-TFB型组织摊烤机（湖南富光医用电子技术有限公司），高速大容量冷冻离心机（型号：BIOFUGER 2001 75105282），血气分析仪（型号:BW31OPTICCA ），BMJ-Ⅲ型包埋机（徐州康威电子仪器制造厂），PXQ.SG41.280手提式压力蒸汽灭菌器（贵州天佑医用仪器有限公司），石蜡切片机（型号：LEICA RM2235型），美的微波炉等。
4 主要溶液的配制
4.1 PBS缓冲液的配制
8.0g NaCl，0.22g KCl，2.0g K2HPO4及0.23g KH2PO4，在800 ml 蒸馏水中溶解，用 HCl将溶液的pH值调节至7.4，后加蒸馏水将容量到1 L。在4℃冰箱中保存。
4.2 D EPC水的配制
在1000ml双蒸水中，加入1mlDEPC，后置于1000ml容量瓶中，放置4个小时。
4.3 75﹪的乙醇DEPC水配制
在1000ml双蒸水中，放入1mlDEPC。按3:1的体积比例将100﹪乙醇与DEPC水配制成需求量后静置12小时，进行高压灭菌操作。
5 大鼠肺组织及动脉血、血清标本的留取
5.1 肺泡灌洗液留取本文来自辣.文,论-文·网原文请找腾讯32'49114
大鼠制作成功36h小时，使用乌拉坦麻醉。将大鼠右主支气管结扎，对大鼠左肺进行肺泡灌洗。首次按16ml kg-1比例灌入0.9﹪灭菌生理盐水， 20ml注射器回收肺内灌洗液。此后肺内灌注液体量与前次的回收量相等。灌洗4次，
上一页 [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] [9] [10] 下一页
ω-3多不饱和脂肪酸对ARDS大鼠的保护作用及机制研究 第6页下载如图片无法显示或论文不完整，请联系qq752018766
