普通培养基及药液培养基的制备
普通培养基的制备[13]：制备牛肉膏蛋白胨琼脂培养基和营养肉汤培养基。
牛肉膏蛋白胨琼脂培养基的制备方法：牛肉膏3g，蛋白胨10g，氯化钠5g，琼脂15～20g，蒸馏水1000mL。配制时先加蒸馏水于大烧杯中，将上述牛肉膏、蛋白胨、氯化钠3种物质溶解，再放入称好的琼脂，加蒸馏水至1000mL，加热融化。冷却至50～60℃后用0.1mol/mL NaOH或0.1mol/mL HCl调节pH值至7.0～7.2，分装于三角瓶中并包扎好。
营养肉汤培养基的制备方法：同上，不加琼脂，配好后分装于试管中。
将包扎好的三角瓶、试管、培养皿等置于高压灭菌锅内，在0.1Mpa、121℃条件下湿热灭菌20min，然后于超净工作台上趁热将固体培养基一部分分装于已灭菌的大试管中制成斜面，一部分倒平板。将平板及斜面置于37℃恒温培养箱中做无菌检测，无污染的斜面用于活化菌种。平板及液体培养基用于后述试验。
药液培养基的制备[14]：将提取液原液用液体培养基进行倍比稀释，得到含药液提取物浓度分别为0.5g/mL、0.25g/mL、0.125g/mL的药液培养基。
1.2.3 菌种活化、菌悬液的制备及筛选[15-16]
用无菌接种环分别从试管斜面上挑取大肠杆菌少许接种于斜面上，37℃活化培养24h。分别挑取活化后的大肠杆菌的单个菌落放入无菌生理盐水中制备成菌液，采用菌悬液OD值测定及平板菌落计数法调节菌液稀释度，使菌体密度为102cfu/mL。
1.2.4 抑菌率的测定
采用平板菌落计数法[16]计算7个复方中草药提取液不同浓度下的抑菌率，设对照，每个浓度设3个重复。抑菌率(％)={(对照菌落数一处理菌落数)／对照菌落数}×100
1.2.5 最小抑菌浓度（MIC）的测定[17-19]本文来自辣*文~论|文/网，
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采用二倍稀释法，将7个复方中草药提取液分别用营养肉汤培养基稀释，稀释后的药液培养基浓度为0.5g/mL、0.25g/mL、0.125g/mL。MIC的测定：在装有1mL药液培养基的各管中加入0.1mL的菌悬液（菌悬液的菌体密度为102cfu/mL），37℃恒温条件下振荡培养 24h后观察结果，以试管中无浑浊现象出现的最低药液浓度作为MIC，每个浓度均设置3个重复。实验设置对照管。
1.2.6 最小杀菌浓度的测定[20]
将在 MIC 测定中，未见细菌生长的各管培养物中吸取 0.1mL 涂布平板，37℃条件下培养 24h，观察结果，菌落数小于5个的最小稀释度即是最低杀菌浓度。
1.2.7 抑菌圈大小测定
采用药敏纸片法[21-22]测定各组复方中草药提取液的抑菌圈直径。将滤纸用打孔器制成6mm的小圆纸片，高压灭菌后放入1g/mL的各组复方中草药提取液中，浸泡1~2h，制成药敏纸片，干燥后备用。吸取0.1mL的菌悬液于平板中央，用玻璃涂棒将菌液均匀涂布于平板上。含菌平板倒置干燥约30min后，用无菌镊子取药敏纸片均匀贴在平板上，每个平板贴5个药敏纸片。20min后，将平板放入37℃恒温培养箱中倒置培养18~24h。用毫米刻度尺测量抑菌圈直径。每个处理设3次重复，以无菌生理盐水做对照。
药敏纸片法可参考以下标准记录结果：抑菌圈为16mm～20mm，表示高度敏感；11mm～16mm，表示中度敏感；10mm～11mm表示轻度敏感；<10mm，表示不敏感。
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