1.3.2 普通培养基及药液培养基的制备：
①普通培养基的制备[10]：用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基作为细菌培养基。
②药液培养基的制备[11]：将提取液原液用液体培养基进行倍比稀释，得500 mg/mL、250mg/mL的稀释药液，将稀释药液与大肠杆菌菌悬液按比例混合，37℃恒温下摇床震荡培养24h。
1.3.3 菌种活化及菌悬液的制备
在超净工作台上用无菌接种环从试管斜面上挑取大肠杆菌少许接种于营养琼脂培养基上，37℃活化培养24h[12]。挑取活化后的大肠杆菌的单个菌落放入无菌生理盐水中制备成菌悬液，调节菌液稀释度，用平板菌落计数法[13]测定其菌体密度，菌体密度达到102cfu/mL的菌悬液即为本实验合适的供试菌悬液。
1.3.4 抑菌率的测定
在超净工作台内，将经过加热熔化的营养琼脂培养基倒入无菌培养皿中，凝固成平板待用。取1.3.2中经摇床震荡培养的药液培养基0.2mL，涂布平板，用无菌生理盐水做对照。将涂布好的平板倒置放入37℃的恒温箱中培养24h后统计菌落个数，计算抑菌率。抑菌率= (对照菌落数-处理菌落数)÷对照菌落数×100%[14]。涂布平板时每种稀释度设置3个重复，抑菌率用3次重复的平均值表示。
1.3.5 最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度(MBC)的测定
采用二倍稀释法[15-16]，将7组复方中草药提取液分别用营养肉汤培养基稀释，稀释后的药液培养基浓度为500mg/mL、250mg/mL、125mg/mL。MIC的测定：在装有1mL药液培养基的各管中加入0.1mL的菌悬液（菌悬液的菌体密度为102cfu/mL），37℃恒温条件下培养 24h后观察结果，以试管中无浑浊现象出现的最低药液浓度作为MIC，实验设置对照管。MBC的测定：将在MIC测定中，未见细菌生长的各管培养物中吸取0.1 mL涂布于牛肉膏蛋白胨固体培养基上，37℃条件下培养 24h，观察结果，以仍无细菌生长的管内药物浓度记为该药物的MBC。
1.3.6 药敏纸片法测抑菌圈直径
中草药提取液抑菌圈测定采用的是药敏纸片法[17]，选取吸水性较好的滤纸，用打孔器打成直径为6mm的圆形滤纸片，并高压蒸汽灭菌后备用。在超净工作台上将溶化后的营养琼脂培养基倒平板，每皿大约15~20mL，凝固后备用。用无菌吸管吸取0.1mL的菌悬液滴入平板中，用涂布棒将菌悬液涂布均匀。将制备好的圆形滤纸片在各组复方中草药提取液（浓度为1g/mL）中浸泡1h后，用无菌镊子夹取浸透药液的滤纸片，沥去多余的药液后将其贴于上述制备好的含菌平皿上，每皿贴5片，并用无菌生理盐水做对照，然后将培养皿置于37℃恒温箱中培养24h，培养结束后测量抑菌圈直径，比较各组的抑菌效果。
药敏纸片法可参考以下标准记录结果：抑菌圈为16 mm～20 mm，表示高度敏感；11 mm～16 mm，表示中度敏感；10 mm～11 mm表示轻度敏感；<10 mm，表示不敏感。
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