1.4 高效液相色谱法

高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等[16]。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析[17]。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术[18]。

1.4.1 高效液相色谱法特点

高效液相色谱法的特点：1. 高压，流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压；2. 高效，分离效能高[19]。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍；3. 高灵敏度，紫外检测器可达0.01 ng，进样量在μL数量级；四是应用范围广，70％以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势；5. 分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析１个样品在15-30 min，有些样品甚至在5 min内即可完成，一般少于1 h。此外高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点[19]。来~自^751论+文.网www.751com.cn/

高效液相色谱法与气相色谱法相比各有所长，相互补充。高效液相色谱的缺点是有“柱外效应”。在从进样到检测器之间，除了柱子以外的任何死空间（进样器、柱接头、连接管和检测池等）中，如果流动相的流型有变化，被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽，柱效率降低[20]。高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。