2.3实验步骤

（1）好氧发酵实验

采用自制污泥发酵罐6个，分别加入不同微生物菌剂模拟好氧发酵过程，通过恒温循环水将发酵罐环境温度控制为300C。利用微型曝气装置进行通气0.5h，停1h的间歇曝气，维持好氧状态。发酵持续21天，每7天对发酵罐污泥进行翻堆。

（2）多环芳烃提取实验

①各取6种发酵样品200g于铝箔纸中，放入冰箱冷冻不少于24小时后利用冷冻干燥机进行干燥。

②称取磨细过1 mm筛干燥的发酵泥样各5g于500 mL锥形瓶中(设置3个平行样品)，加入纯二氯甲烷80 mL。

③利用超声波清洗机对上述锥形瓶中的样品进行超声提取，超声90min以萃取泥样中的多环芳烃。

④另取用于旋转蒸发的烧瓶，对应上述锥形瓶贴好标签。将萃取出的上清液通过长颈漏斗过滤到烧瓶中，为了减少误差，提取液倒完后都要用少量提取剂冲洗两遍原锥形瓶，冲洗液也要倒入相应的漏斗中。

⑤过滤后的提取液经旋转蒸发仪蒸发浓缩至约2mL，转移至4mL样品瓶中，蒸发后的烧瓶要用提取剂清洗2到3遍，清洗液一同转移至4 mL样品瓶中待用。

⑥称取干燥过的柱层层析硅胶7g溶于二氯甲烷中填柱，柱体上层撒3.5-4g无水硫酸钠用于除去有机溶液中的水份。将提取液加入硅胶柱中流至尽干后依次加入50mL二氯甲烷，50mL二氯甲烷与正己烷1:1混合液，50mL正己烷洗脱，收集洗脱液。

⑦收集液经旋转蒸发仪蒸发浓缩至约2 mL，转移至4 mL样品瓶中，蒸发后的烧瓶要用提取剂清洗2到3遍，清洗液一同转移至4 mL样品瓶中待用。

⑧样品经氮吹仪吹干，再用移液管移取1 mL甲醇定容，经有机系针头过滤后待上机检测。

（3）高效液相色谱(HPLC)分析来!自~751论-文|网www.751com.cn

高效液相色谱测定条件:色谱柱为 Athena PAHs多环芳烃专用柱(上海安谱科学仪器有限公司)，250 mm × 4. 6 mm i. d. × 5 μm; 流动相A为水,流动相B为乙腈, 总流速为2.0 mL/min，梯度洗脱条件：0-25min，60%-0%A；25-35min，0%A；35-45min，0%-60%A；紫外检测波长为266nm，柱温为30℃，进样量5uL。

3结果与讨论 

3.1 16种多环芳烃标准曲线

以甲醇为溶剂稀释16种PAHs混合标准母液配制不同浓度的PAHs混合标准溶液，以出峰面积和浓度的线性关系作工作曲线，16种多环芳烃的标准曲线见表3-1。样品测试时根据标准溶液中的各组分保留时间进行定性，采用标准曲线法定量。