1.4 多糖及甘草多糖研究进展和提取方法
1.4.1 多糖及甘草多糖的研究概况
糖类的研究已有百余年的历史[8]。虽研究较早，但因基础研究的困难，长期未受重视，研究水平较蛋白质、核酸低得多。近十年来，由于膜的化学功能，免疫物质的化学研究与发展，以及新药物资源的寻找和研究等，发现糖类在生物体内的作用不仅是作为能量资源或结构材料，更重要的是参与了生命现象中细胞的各种活动[9]，具有多种多样的生物学功能，因此糖类的研究开始逐步活泼起来。
糖类是自然界最多的有机化合物，多糖是重要的生物高分子化台物。多糖在自然界分布极广。现已从天然产物中分离出300余种多糖类化台物[5]。按来源不同，多糖可分为五大类：真菌多糖、高等植物多糖、藻类地衣多糖、动物多糖、细菌类多糖。多糖作为药物进行研究始于40年代，50年代末对真菌多糖抗癌效果的发现使人们开始了多糖的系列化研究。日本在60年代的研究表明多糖具有复杂的、多方面的生物活性和功能：多糖可作为广谱免疫促进剂，具免疫调节功能，如多糖能治疗风湿病、慢性病毒性肝炎、癌症等免疫系统疾病，甚至能抗AIDS病毒：还具有抗感染、抗放射、抗凝血、降血脂．促进核酸与蛋白质的生物合成作用；能控制细胞分裂和分化，调节细胞的生长与衰老。而且多糖作为药物其毒性极小，因而多糖的研究已引起人们的极大兴趣。中国对多糖的研究始于70年代，由于我国有非常丰富的中草药资源和雄厚的传统中医理论，近年来对植物多糖的研究发展很快，研究水平日益提高，层次日益深入，其中对免疫机理、抗肿瘤活性的研究已深入到分子水平，在多糖的分离提取、结构分析方面己做了不少工作。
甘草多糖(GPS)作为植物多糖的一种，具有诸多的生物活性。现己发现GPS具有抗病毒活性[7]，并已有小分子甘草多糖a一吡喃葡聚糖从生药甘草中提取纯化出来。并且国内首次报道了从药厂生产后的废弃的甘草残渣中提取纯化出来了a一吡喃葡聚糖。据日本文献报道，从甘草中提取的多糖具有较强的免疫作用及抗肿瘤活性，但有关多糖的含量测定尚见报道的很少[18]。徐红、帕丽达、堵年生、邢文斌(1999)在《甘草多糖的提取及含量测定》一文中采用苯酚一浓硫酸反应后，用分光光度法对产自新疆的药用甘草根的多糖进行了含量测定。乇航宇，刘金荣．江发寿等(2002)采用超声提取法提取甘草多糖，苯酚一浓硫酸比色法对甘草多糖进行了含量测定。王振荣、邓立育、郭伟玲、岳秀丽等(2000)在《黑龙江、新疆、安徽产甘草中糖、总皂甙及总黄酮成分的比较研究》一文中采用比色法和重量法分别对黑龙江、新鞭、安徽产地的甘草中总糖和多糖进行了定量分析和比较．从而建立了甘草中有效成分测定的简便方法[6]。
1.4.2 多糖的提取方法
提取多糖通常采用水提醇沉法。影响热水浸提多糖的因素主要有提取时间、提取次数、溶剂体积、浸提温度等，其中温度最为重要。温度越高，多糖得率越高。杨林莎[7]等通过正交实验得到最优工艺条件：浸提温度65℃，溶剂体积15倍，浸提3次，浸提时间2h。在此条件测得多糖得率为5.2%。超声波、酶法等辅助手段因其节约溶剂、缩短提取时间、提高提取率等优点广泛应用于植物成分提取。
当前国内外多糖提取的方法主要有[8]:热水提取法、微波辅助法、超声波法、酶法、酶法-超声波协同萃取法五种。
（1）热水提取法
热水提取法是最传统的方法，在我国已有几千年历史，中药的煎煮以及早期中药有效成分的提取均采用此法。热水提取法的原理是利用水作溶剂，在高温下将多糖溶出，杨全等人用热水提取法对桑黄菌丝体多糖提取的优化方案[10]为：液料比1:50，温度90℃，煮两次，每次2h，粗多糖提取率为3.22%。 甘草多糖提取工艺条件研究(4):http://www.751com.cn/shengwu/lunwen_17178.html