1.4.3 瘤胃发酵参数:试验期第6和8周第7天早晨饲喂后(3h)用口腔采集瘤胃液的方法采集所有湖羊瘤胃液,用于发酵参数的分析:试验第6周和第8周,晨饲后3h经口腔使用负压导管采集瘤胃液,参照申军士等[9]方法将采集的瘤胃液充分搅拌后用四层纱布过滤,过滤后的瘤胃液用于发酵参数(pH值、VFA、NH3-N)的测定,其中,pH值应立即使用pH计测定,其余样品-20℃保存待测。参照Nyachoti等[10]描述的方法,使用氯化铵作为标准品,利用比色法测定氨氮浓度。另取瘤胃液1 mL于加有0.2 mL偏磷酸巴豆酸混合液的2 mL离心管中,冻存于-20℃,用于挥发性脂肪酸测定;参照申军士等[9]方法,流水解冻后9000 g的离心力条件下离心10 min,取上清液通过0.22 μm针式滤器过滤,溶剂为乙醚,使用气相色谱仪(美国,安捷伦,7890A)测定挥发性脂肪酸;测定条件,进样口温度:220℃,柱箱温度:150℃,检测器温度:250℃,分流比:30:1。
1.4.4 血液生化指标:试验期第6和8周第6天早晨饲喂后3h间对所有试验湖羊进行颈静脉釆血10ml,3000rpm离心15分钟分离血浆,取血浆于-20℃下保存待测。胆固醇、三酰甘油、碱性磷酸酶、葡萄糖、血尿氮、白蛋白、球蛋白(Globulin)、肌酸酐、尿酸等指标利用全自动生化分析仪测定。
1.4.5 尿样:试验期第9周点收样法(10:00和16:00)连续三天采集每只湖羊尿样共计20 mL/只,并立即按1:1比例加入6M盐酸酸化,用于氮平衡(利用率与排放率)分析,样品于-20℃保存待测。根据尿中肌酐作为内源指示剂估计尿排放量 [11]。尿肌酐一天的排放量因动物种类和体重而不同,同一种动物尿液肌酐排放量与体重0.75为恒定系数,育肥羊为0.33mmol/kg BW0.75。使用南京建成肌酐测试盒(苦酸法,南京建成赛浩科技有限公司,货号C011-1)测定尿液肌酐浓度。排尿量=0.33*BW0.75/肌酐浓度。尿N排放量=排尿量*尿中N百分含量%。
1.5 统计分析
试验所得数据经Excel初步处理后,采用利用SAS 9.2广义线性模型(GLM)对所有指标进行方差分析和显著性分析,多重比较采用Duncan法,P < 0.05表示差异显著。
2 结果与分析
2.1 日粮氮源和乳酸链球菌素对湖羊瘤胃发酵的影响
由表2的数据可见,在不同日粮氮源条件下(豆粕和DDGS),在日粮中添加乳酸链球菌素对湖羊瘤胃的PH值、乙酸、丁酸、戊酸、异丁酸等均无显著影响(P > 0.05)。
DDGS作为氮源显著降低瘤胃乙酸、丁酸、异丁酸、异戊酸以及乙酸/丙酸比(P < 0.05),总挥发酸有降低的趋势(P = 0.05),而对丙酸和戊酸无显著影响(P > 0.05)。 日粮氮源与乳酸链球菌素对湖羊瘤胃发酵血液生化及氮平衡的影响(4):http://www.751com.cn/shengwu/lunwen_20795.html