摘要：内生真菌能促进其宿主鹅观草的苗期生长和分蘖，揭示了禾本科植物/内生真菌共生体可作为禾本科作物育种利用的可能性。本实验选取含菌（EI）和经热处理后除菌（EF）的鹅观草种子长成的植株，通过CTAB法提取鹅观草的基因，合成引物，利用同源基因克隆技术对鹅观草分蘖相关基因进行克隆分析，从EI和EF植株中分别获得了片段为883bp、848bp的AuxIAA基因。以期阐明内生真菌促进鹅观草分蘖机理。26634
关键词：分蘖基因；Epichloë sinica；鹅观草；序列比对
Analysis of Tillering related genes of Epichloë sinica- Roegneria kamoji Symbionts
Abstract：Epichloë sinica can promote the growth and tillering of Roegneria kamoji, and reveal the potential of gramineous crop breeding by the gramineous plant/ E. sinica symbiosis. In this study, endophyte infected (EI) and endophyte free (EF) Roegneria kamoji seeds were prepared by heat treatment. Plants genomic DNA were extracted by CTAB methods. The tiller-related genes were amplified by homologous gene cloning method. 883bp, 848bp fragment of AuxIAA gene were finally obtained in EI and EF plants. It will be helpful to elucidate the tillering mechanism of Roegneria kamoji from the level of gene and molecular regulation.
Key words: Tillering gene；Epichloë sinica；Roegneria kamoji; Alignment
目 录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1实验材料2
1.1.1实验试剂3
1.1.2仪器与设备3
1.2实验方法3
1.2.1 DNA提取3
1.1.2 DNA浓度和质量检测3
1.2.3引物设计和筛选3
1.2.4质粒转化4
1.2.5序列分析4
2结果和分析 5
2.1 DNA提取5
2.2引物筛选5
2.3序列分析5
3讨论6
3.1 结果分析6
3.2 展望7
致谢7
参考文献8
内生真菌-鹅观草共生体分蘖相关基因的克隆
内生真菌指的是完全生活在植物体内，或在其生活史的某些重要阶段处于植物体内的真菌。它们对植物病原具有明显的拮抗作用，可以增强植物的抗病、抗旱、抗虫、抗寒能力，促进肥料吸收以及植物生长和分蘖、增产能力等。在田间，内生真菌Epichloë sinica能促进其宿主鹅观草的苗期生长和分蘖[1]。
分蘖对禾本科植物具有重要意义，一方面可以促进植物对土壤养分的有效利用，另一方面，植物可以通过分蘖形成大量营养，促进个体发育。分蘖还有利于植物营养面积的扩大，增强植株的占有能力，有效抑制杂草危害，增强植物的抗性和适应性。 一般认为，禾本科植物中的分蘖数由受环境条件影响的，多基因控制的数量遗传性状。分蘖过程是由多基因精密调节、综合表达，以及遗传、激素和环境间相互作用，这些基因间可能存在多条通路来影响着分蘖的发生和发展。近年,发现了一系列调控植物侧芽、侧枝发育的基因，例如GRAS蛋白家族，GRAS 转录因子家族是高等植物所特有的一大类具有相当保守羧基末端的蛋白质家族,在烟草、水稻等植物中均有发现, 已被证实在植物分蘖过程中发挥着十分重要的作用[2]。
目前，一些与分蘖相关的已被克隆的基因有包括MOC1基因，LRC1基因，Tin基因和D3基因等。
表1.禾本科植物分蘖相关基因
Table 1.Tillering gene of gramineous plant
基因名称 植物 功能 其他重要信息 参考文献
MOC1 水稻 参与分蘖芽的形成和促进分蘖芽伸长的功能，可减少水稻分蘖 对OSH1 基因及OsTB1 基因具有调控作用 [3][4]
LRC1 赖草 调控根茎分化 与水稻MOC1基因是同源基因 [3] 内生真菌-鹅观草共生体分蘖相关基因的克隆:http://www.751com.cn/shengwu/lunwen_20868.html