1.2生物信息学分析软件
1.2.1理化性质分析
利用Protparam(http://expasy.org/ proteomics)工具来分析油菜疾病抗性蛋白序列中氨基酸的组成。
1.2.2蛋白的磷酸化、跨膜区、信号肽、亚细胞定位及保守域的分析
利用NetPhos 2.0软件(http://expasy.org/proteomics)预测磷酸化作用位点,利用TMHMM(http://www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM-2.0/)软件来进行跨膜区的预测,利用SignalP 4.1Server软件预测氨基酸前导肽中的信号肽序列,利用TargetP 1.1 Server软件预测氨基酸前导肽的细胞定位,通过BLASTp检索非冗余蛋白质数据库预测保守域。
1.2.3油菜疾病抗性蛋白的紊乱区和球蛋白区预测
利用GlobPlot软件(http://globplot.embl.de/)对该油菜疾病抗性蛋白序列中的紊乱区、球蛋白区进行预测分析。
1.2.4油菜疾病抗性蛋白的二级结构预测与分析
利用SOPMA软件预测该油菜疾病抗性蛋白序列的二级结构[9]。
1.2.5油菜疾病抗性蛋白的三级结构预测与分析
利用Geno3D同源建模方法对该油菜疾病抗性蛋白进行模板匹配,获得同源序列后运行建模程序,获得建模结果后下载,再利用视图软件Rasmol进行可视化[10]。利用Ramachandran图来评价蛋白质结构中转角的易变程度,并评估模拟的结构是否与自然结构趋势相同[11]。
1.2.6油菜疾病抗性蛋白的进化分析
将油菜疾病抗性蛋白与其近缘十字花科植物的蛋白序列利用DNAMAN软件进行垂直同源比对,并构建进化树;对油菜疾病抗性蛋白序列利用DNAMAN软件进行水平同源比对,并构建进化树。
2 结果与分析
2.1油菜疾病抗性蛋白的理化性质分析
对油菜疾病抗性蛋白(XP_009120982.1)基本理化性质进行预测,表明该蛋白质分子式为C7205H11310N1920O2185S66,分子量为161906.5,理论等电点(pI)为5.08,氨基酸组成中(如表1)含有20种基本氨基酸,含量最高的是Leu(12.1%)和Asp(8.7%),含量最低的是Trp (1.4%) 和Met(1.8%),带负电荷残基238个(16.7%,包括Asp,Glu),带正电荷的残基179个(12.6%,包括Arg,Lys),在280nm处该蛋白质水溶液的消光系数(Extinction coefficients)为42665,其不稳定系数为41.98,是一种不稳定蛋白,脂肪系数为89.41,平均总亲水性(Grand average of hydropathicity (GRAVY) 为-0.330 油菜疾病抗性蛋白序列特性与进化分析(3):http://www.751com.cn/shengwu/lunwen_28570.html