摘要：从周口市川汇区施用过甲基托布津的蔬菜园中采集的土壤样品中，通过富集培养筛选出一株能以甲基硫菌灵为唯一碳源生长并能降解甲基托布津的细菌ZY01。通过对菌落形态特征的观察，生理生化实验和微生物测序的分析，鉴定所选育出的菌株为假单胞菌属(Pseudomonas )，与壬二酸假单胞菌（Pseudomonas azelaica）最为接近。菌株ZY01在适宜条件下培养7d，将300mg/L的甲基托布津降解了72.6%。39412
毕业论文关键词：甲基托布津;分离纯化;鉴定;微生物降解
Screening and  identification of mildothane degrading bacterium
Abstract:A bacterial strain named ZY01 which could use mildothane as the only carbon source grothing and degrade the pesticide Thiophanate-Methyl was collected form the soil in herbary of agromedicine contamination in ZhouKou ,and it was identified as Pseudomonas and closely to Pseudomonas azelaica by analyes of morphology ,Physiological-Biochemical test and 16SrDNA. 7days, under the appropriate conditions  ZY01 can degrade  the  moldothane(300mg/L)  to 27.4%.
Keywords: Mildothane；Separation and Purification；  Evaluation ； Micro-biological Degradation
目    录

摘要    1
关键词    1
引言    1
1.材料与方法    3
1.1 主要试验试剂和仪器    3
1.2 土壤样本采集    4
1.3 培养基配制    4
1.4菌种分离与纯化    4
1.5甲基托布津标准曲线的绘制    5
1.6菌株降解率的测定    5
1.7菌株最适生长温度测定    6
1.8菌株生长情况测定    6
1.9菌株的鉴定    6
1.9.1形态学鉴定    6
1.9.2生理生化试验鉴定    6
1.9.3菌株16SrDNA鉴定    6
2.结果与分析    6
2.1甲基托布津标准曲线图    6
2.2菌株降解率测定结果分析    7
2.3菌株最适生长温度结果分析    7
2.4菌株生长情况分析    9
2.5菌株形态学鉴定结果    9
2.6菌株生理生化鉴定结果    10
2.7 16SrDNA鉴定结果    10
3.结论与讨论    12
参考文献    13
致    谢    16
甲基托布津降解菌的选育及鉴定引言
农药作为广泛使用且和人类发展有关的化学物，降解其在环境中的污染主要在于生物和非生物两大层面，大量研究表明微生物在农药降解中占主导地位[1]。降解速度因农药的不同而存在较大差异，部分农药像DDT等很难降解，而且在食物链中聚积[2-3]；部分农药像有机磷类等容易降解[4]；此外，一些农药像克百威很容易降解，但不利于防治病虫害[5]。
20世纪40年代，有关于生物降解的研究开始进行，从微生物对有机物的破坏或矿化为生物降解的最初认识 [6]，到部分微生物降解菌制剂的应用，人们对生物降解认知的愈加透彻 [7]。
经过对微生物降解农药的不懈研究，至今已取得很大进展，农药降解机理透彻的研究，降解菌降解能力的强化 [8]，更多不同种的农药降解菌被发现等都是有力的证明[9]，
我国现已有部分农药降解菌制剂研制成功，其中一些通过了专家的鉴定，而且有些药剂已投入到生产应用中[10]，如南京农业大学李顺鹏教授研制的“佰绿得”；中国农科院的范云751院士等克隆的有机磷降解酶基因利用“毕赤酵母”高效表达等[11]。
甲基硫菌灵(Thiophanate-Methyl)商品名为甲基托布津，纯品是无色结晶，熔点172℃，基本不溶于水，可溶于丙酮、乙醇、氯仿等有机溶剂，对酸碱稳定[12]。70%、50%为淡褐色可湿性粉末，40%胶悬剂，10%乳剂。甲基硫菌灵是一种广谱、内吸性杀虫剂。对赤霉病、水稻稻瘟病、油菜菌核病、蔬菜白粉病、番茄叶霉病、棉花苗期病害、柑橘储藏期病害等有很好的防治效果[13]。 甲基托布津降解菌的选育及鉴定:http://www.751com.cn/shengwu/lunwen_39703.html