3.1 TaRboh基因对拟南芥镉胁迫下SOD活性的影响 5

3.2 TaRboh基因对拟南芥镉胁迫下CAT活性的影响 6

3.3 TaRboh基因对拟南芥镉胁迫下Pro.活性的影响 7

3.4 TaRboh基因对拟南芥镉胁迫下丙二醛含量的影响 7

3.5 TaRboh基因对拟南芥镉胁迫下POD活性的影响 8

4  结论 8

参考文献 10

致  谢 11

TaRboh基因在拟南芥对镉胁迫的响应    引言

    拟南芥是植物研究对象中的模式之物之一。拟南芥属于被子植物门-751;文'论[文]网www.751com.cn，双子叶植物纲，二年生草本，我国内蒙、新疆、陕西、安徽、湖北、四川、云南等省区都有拟南芥。拟南芥的优点很多，例如植株小、结子多，生长周期相对较短，其基因组是目前已知植物基因组中最小的。而且，拟南芥是自花受粉植物，基因高度纯合，用理化因素处理突变率很高，容易获得实验结果，这些优点使拟南芥成为遗传学研究的好材料，被科学家誉称“植物中的果蝇”。现如今，环境因素例如气候变化导致的土壤干旱、盐渍化、高低温胁迫，还有化学药物导致的病原菌、重金属[1]过量等逆境胁迫都会严重影响植物的正常生长、品质和收获。虽然高等植物本身具有一定的抗逆性，但当重金属浓度突破植物的自我调节能力时，就会引起植物细胞和组织的损害，影响植物的良好生长。因此当今模式之物拟南芥的抗逆性课题的研究受到越来越多人的关注，而Rboh基因是研究热点之一。在本次实验中，拟南芥转入的TaRboh基因是农作物体内基因序列中的基因，其中，Rboh即呼吸爆发氧化酶，是植物活性氧[2](reactive oxygen species, ROS) 的主要产生者。Rboh又称NADPH氧化酶[3](NADPH oxidase, NOX) 是一种广泛存在于生物界产生ROS的关键酶，近几年研究发现，活性氧爆发是植物应对胁迫反应的普遍特征。NADPH氧化酶则被广泛认为是植物胁迫[4]反应下产生并积累ROS的主要来源，过去许多研究认为ROS对植物的生长具有抑制作用，但后来经研究证实，在合适的胁迫条件下，ROS对植物的生长发育还有促进作用，例如作为第二信使引导植物次级代谢产物的调控等。除此之外，越来越多的实验表明，NOX酶诱导产生的活性氧ROS在植物的正常生长及代谢[5]过程中还有许多其它重要的功能。植物的Rboh基因主要是在植物生长发育及胁迫反应中起作用,其活性主要受钙离子、蛋白磷酸化、Rac蛋白以及ABA[6]所调控。将TaRboh的基因导入拟南芥体内，研究其生理作用[7]对于转基因领域的学术研究是一种创新，同时对于拟南芥在受胁迫情况下更好的生长从而获得长势良好的拟南芥也有一定的作用。

1 实验材料及设备

1.1 实验材料

    本实验用到的转基因拟南芥是由西北农林科技生命科学院细胞生物学实验室提供，三种类型的拟南芥分别是：野生型（WT)，突变体（A2、A4）,超表达（OE-26-6-3、OE-26-6-7）培养皿，封口膜，小喷壶，双面板，1ml移液枪，1ml枪头，离心管，镊子，营养土，酒精灯，保鲜膜等。