2.1.2培养基

内生菌分离培养基：LB培养基、TSA培养基、营养琼脂(NA)培养基、ISP2培养基。

促生筛选培养基: 有氮培养基、SM 培养液、无氮培养基、无机磷培养基[6]。

将以上培养基配置好后在高压灭菌锅内进行灭菌20 min，115℃的灭菌。

SMA培养基: 向灭菌后的SM 培养基中加入已经通过细菌过滤器除菌后的1- 氨基环丙烷-1- 羧酸(ACC), 使其终浓度为6ml/L。

剩余生理生化及酶学试验按照《放线菌快速鉴定与系统分类》[7]及《放线菌系统学-原理、方法及实践》[8]的方法进行。

2.2促生能力的检测

2.2.1分泌植物生长激素IAA能力的测定

定性测定:配制5mg/ml的色氨酸溶液，通过微孔滤膜过滤除菌后，加入已经通过高压灭菌的有氮培养基，使得色氨酸的最终浓度为0.5mg/ml，将取5ml的培养液分装于灭菌的试管中。同时，挑取纯化后的菌株并接种于分装后的无菌试管中，28℃的摇床培养7天后!751·文~论^文'网www.751com.cn，使用移液枪取出1ml菌液并加入灭菌后的试管中，并加入2ml的 Sackowcki’s 显色剂[9]充分混匀，在室温下显色30分钟，溶液呈粉红色，则为阳性，说明该菌株产IAA。

定量测定:按上述方法培养阳性菌株，在暗处放置20分钟后，测定其OD540值。每个菌株设置4个平行，采用分析纯的IAA稀释梯度制备而绘制其标准曲线。

2.2.2产ACC能力的测定

将菌株点接于SMA培养基上，在相同要求下的5次传代培养后，依然可以在以ACC为独一氮源的SMA培养基上发展的菌株，则为能产ACC脱氨酶的阳性菌株[10]。

2.2.3产铁载体能力的测定

将菌株点接于CAS检测培养基的平板中，放置在28℃培养箱中培养48小时左右后，观察菌落的周围是否泛起黄色晕圈。若有晕圈呈现，则说明该菌株拥有产生铁载体能力[11]。

2.2.4固氮能力的测定

将菌株接种于无氮培养基上，在28℃的条件下进行7天的培养后观察其生长状况[14]，并在相同条件下转接5次，仍能在无氮培养基上生长的菌株，则为具有固氮能力的菌株。

2.2.5解磷能力的测定

将菌株点接在无磷培养基上，28℃培养5-7天，观察菌落一圈是否有溶磷圈呈现，若有该菌株则为阳性[12]。