5.2. 讨论 14

参考文献 15

致谢 17

1. LMO4

1.1. LMO4的传统功能研究

先前对于LMO4的研究主要集中在与肿瘤发生发展的关系上。LMO4在增殖细胞中强表达，如小肠隐窝细胞和皮肤和舌头的基底细胞[21]。 LMO4在乳腺癌和口腔癌中过度表达，小鼠体内LMO4的过表达会导致增生和肿瘤的形成[22]。这些发现都表明LMO4蛋白是上皮增生的重要调节器。

有研究报道LMO4在乳腺上皮细胞中参与一种异常的多蛋白复合体（复合体也包含卵巢癌易感基因BRCA1 和CtIP）的形成[10]。此外，与LMO4相互作用的蛋白质包括有畸形表皮自主调节因子Deaf-1 [11], Grainyhead-like上皮反式激活因子(1) GET-1 [12]，bHLH protein HEN1 [13]以及Smad8-一种涉及BMP通路的蛋白[14]。

1.2. LMO4在内耳形态发生中的作用

在世界范围内大约有2.78亿人患有中度甚至以上的听力损失，而中国的听力语言残疾患者就有高达2780万人。聋病主要包括有传导性耳聋和感音神经性耳聋两种。50年来，传导性耳聋的防治经验已经逐渐成熟，而感音神经性耳聋的预防以及治疗是聋病基础研究的热点与难点所在。在临床上,很多感音神经性耳聋是由内耳发育异常引起的。内耳畸形和耳聋病程复杂，功能缺失是不可逆的，治疗方法较为局限。寻找更多的导致耳聋以及内耳畸形基因，探索致畸致聋的机制，并且筛选出针对发病机制的特异性治疗制剂，这已经是耳科学基础以及临床研究者要负担的共同责任。LM04基因编码的是一种转录调节因子，小鼠耳泡中LM04的组织特异性敲除，能够导致半规管发育异常以及半规管嵴发育不良。斑马鱼中lmo4的两个同源基因分别是lmo4a以及lmo4b，两者都是母源性基因。10hpf,lmo4a主要在中胚叶和神经板中表达；14hpf开始在耳基板、耳泡及周围基质表达；lmo4a的 表达范围与毛细胞区域随着耳泡的发育开始有部分的重叠，并且标记与半规管发生有密切联系的3个半规管嵴以及半规管突起。lmo4b在耳泡、周围基质、及侧线中持续表达。lmo4a低表达诱导的耳泡大小、内耳毛细胞和神经节的数量减少是因为lmo4a对前基板早期发育的影响；然而半规管畸形则是由于BMP信号上调所导致的；在耳泡内注射DM小分子即可下调BMP信号，促进半规管发育，从而挽救畸形。

在哺乳动物中感觉细胞不能自发再生，因此耳蜗毛细胞支持细胞的缺陷或丢失会导致永久性听力损失。哺乳动物的螺旋器(OC)具有独特的结构,毛细胞和支持细胞以一种组织严密的模式排列其中。对于感官和听毛细胞形成的分子机制已经有很大进展，但是对于调节OC耳蜗形成的机制尚不明了，需要继续深入探索。

听觉感觉器官的形成被限制在耳蜗的一个专门区域，然而只在这一局限区域形成的分子机制还不是很清楚，耳蜗的其他区域是否有能力形成OC尚不了解。以前的研究表明，操纵一些基因和途径，包括Notch, Wnt, Atoh1, Six1, andEya1可诱导听毛细胞在正常区域之外形成OC。然而，所有这些案例都没有诱导产生eOC，包括和周围的特化细胞类型一样的毛细胞类型的多样性。

已有研究报道LMO核蛋白在内耳发育中不同时间和空间上的表达模式。LMO4最初表达于耳泡的背外侧部分，在整个胚胎发育中其表达持续存在于半规管，黄斑部，嵴和螺旋神经节。因此，LMO4的区域化表达模式与内耳的形态紧密关联，提示着其发挥着重要作用。 带GFP标签LMO4质粒的构建及转染表达(2):http://www.751com.cn/shengwu/lunwen_45255.html