Math Works，Pychophysics toolbox(MATLAB)软件

恒温培养箱：福意联，北京福意电器有限公司  

2.1.3试剂的准备

   10X Steinberg’s Stock：119g Hepes，34g Nacl，2.06g magnesium sulfate，o.8g calcium nitrate，0.5g potassium chloride，1liter water pH7.5

   MS222：500mL Steinberg’s Solution和0.1g MS222 powder混匀，调节pH至7.4。

2.2方法

2.2.1对二甲苯的制备

    对二甲苯母液为0.861g/mL，稀释1000倍，配成400mL溶液存放于棕色瓶中。即在通风厨中取400μL对二甲苯同时加入399.6mL双蒸水。

2.2.2FETAX测试

    20世纪80年代早期，Dumont等建立了FETAX（frog embryo teraoyenesis array-Xenopus，FETAX）方法，是一种可以替代哺乳动物快速筛选发育毒物的方法，FETAX方法还可以用于评价水体污染[3]。通常我们使用青蛙胚胎致畸试验-爪蟾(FETAX)来评估污染物对胚胎的潜在致死性和致畸性，并可进行存活爪蟾幼体的组织病理学检查[5]。首先，通过对一雄一雌的非洲爪蟾进行配对，雌蛙注射600 IU，雄蛙注射300 IU，诱导交配`751^文*论|文\网www.751com.cn。当蛙卵成长到第47期时，对这个时期的蝌蚪进行试验。在实验中取120只蝌蚪，挑选的体表无损、活力良好蝌蚪个体各20只分别置于对二甲苯为0、1、2、2.5、3和4M的玻璃培养皿中，不同浓度的PX用10X Steinberg’s Stock来稀释。培养要求在通气环境下。蝌蚪的培养均放在20℃恒温培养箱中，观察蝌蚪生长状况，确定蝌蚪半数死亡的浓度，以及最低致死浓度。培养7天后，在试验结束时，记录所有蝌蚪存活和死亡数量的数据。幸存的幼体在MS222中麻醉，并记录畸形的幼体的数目。每个生物测定在相同的实验条件下重复三次。