Gateway 技术是基于λ 噬菌体位点特异重组原理的克隆技术。先经过BP反应，将目的基因克隆到入门载体上，形成入门载体，然后通过LR反应使目的基因重组到目标载体上，产生目的克隆[7-10]。与传统的酶切相比有很多优势，成本较低，成功率高[11]。而酶切链接的方法构建质粒载体不易成功，成本较高，操作也繁琐。

而本研究主要探索了集胞藻CCM途径相关基因,在提高光合碳反应效率上是如何起作用的，这一研究对于植物二氧化碳浓缩机制理论的研究很重要[12]，通过Gateway技术将蓝藻CCM途径基因导入到C3植物中，提高光合作用碳反应效率，提高农作物的产量或品质,源^自#751^文/论`文]网[www.751com.cn，最终缓解粮食问题，造福人类[13]。

1.材料与方法

1.1实验材料

1.1.1菌株和载体质粒

大肠杆菌Trans5α和农杆菌GV3101感受态细胞；集胞藻6803基因组DNA  ；pDONR207；35ss-GW-3xHA 全部由周口师范学院植物遗传与分子育种重点实验室提供。

1.1.2酶和试剂

1.1.2.1 酶和抗生素

KAPA HIFI DNA聚合酶

2×Taq PCR StarMix with loading Dye

BP酶

LR酶

庆大霉素

壮观霉素

1.1.2.2 引物

本实验使用的全部引物均有周口师范学院植物遗传与分子育种重点实验室提供