THZ-C恒温振荡器 太仓市实验设备厂

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1.5实验方法

1.5.1确定以整豆为培养基培养纳豆的最佳时间

1）活化菌株：在超净台上挑取划线平板上的纳豆杆菌,源)自(751+文=论]文]网[www.751com.cn，接种于液体LB培养基中，包扎好瓶口，置于37℃下摇瓶培养24h。

2）浸泡大豆：称取大豆200g，浸泡12h，每过2h换一次水。

3）分装大豆：将浸泡好的大豆沥去水，分装于16个250mL的三角瓶中，每瓶装约30g（使大豆正好铺满瓶底），包扎，121℃下灭菌20min。

4）接种菌株：在超净台进行操作，将已活化的菌株接种到冷却后的大豆培养基中，每瓶接种菌液1.5mL，将培养基封口放置在37℃培养箱中培养。

5）纳豆处理与保存：每隔一天（24h），取出4瓶各加20mL去离子水，倒出菌液，标上日期，低温保存备用，共取4d。

6）配置纤维活性平板[15]：取人纤维蛋白30mg于3.5cm的平板中，加生理盐水2mL，使蛋白完全溶解，加入凝血酶30μL，凝固后使用。