1.1实验材料与处理

1.1.1实验材料

实验材料选择的是黄淮海地区大面积种植的大豆品种翼黄13号，选择那些大小相似，颗粒饱满且无病害的大豆种子，将其在四月份播种，包裹在浸润脱脂棉纱中萌发，另准备32只一次性杯子，每两个叠套在一起，其中里面的杯子杯底设置两个小孔（便于换水），32h后，种子播种于每组放有适量均等的石英砂的杯子中（每组杯子中4颗种子）。

1.1.2 材料处理   

温室培养，给予正常的光照与水分，待每棵大豆幼苗长齐四片新叶，对大豆幼苗分别进行30℃、35℃、40℃的高温胁迫，处理过程中应要相应地控制好人工气候箱的环境条件，一方面将光照强度控制在适当的范围内，另一方面空气湿度相应地控制在75%左右，并且按光照处理8 h和黑暗处理16 h，另外，在胁迫过程中为了避免水分缺失给大豆幼苗带来不必要的干扰，记住每天要按时浇水，要保持受高温胁迫的幼苗在水分充足地条件下生长。以室温25℃为空白对照，在第0d、3d、6d、9d分别可测定可溶性糖、可溶性蛋白、丙二醛和游离脯氨酸的含量。

1.2 实验仪器设备   

试管  烧杯  容量瓶  移液管  胶头滴管  玻璃棒  棕色瓶  称量天平  研钵  水浴锅  冰箱  高速离心机  紫外分光光度计  人工气候箱

1.3 生理指标检测

检测大豆叶片可溶性蛋白质含量用考马斯亮蓝G-250染色法[9] 方法进行测定：首先称取0.25~0.5g的大豆幼苗叶片，用5mL蒸馏水或者缓冲液加入适量的石英砂用研钵研磨成匀浆，用3000r/min离心机离心10min，取上清液备用。然后吸取样品提取液0.3mL（视为蛋白质含量的适当稀释），源!自`751'文"论(文`网[www.751com.cn注意不要吸入叶片残渣，轻轻放入试管中（每个样品要重复两次），加入5mL的考马斯亮蓝试剂，摇匀，放置2min，注意吸光光度计需要预热20min，最后利用吸光光度计在595nm下比色，按正确的操作步骤，测定并记录下相应的吸光度值，并通过查得标准曲线测的值得到蛋白质的含量。本次实验样品中蛋白质的含量（mg/g)=查得的蛋白质（µg/g)×提取液总体积（ml）/样品重（g）×测定时加样量（ml）×1000进行计算，以蛋白标准溶液的浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制标准曲线；利用蒽酮法比色法[9]测定大豆叶片中的可溶性糖；利用硫代巴比妥酸法[9] 测量其丙二醛的含量；利用磺基水杨酸提取茚三酮显色法[9] 对脯氨酸的含量进行测量。

1.4 实验数据与分析

可以利用Excel软件对本次实验测得的结果进行处理，并依据所测得的平均值来绘制相关的图表，最后进行数据分析总结。

2 实验结论

2.1 高温胁迫对大豆幼苗叶片中可溶性糖含量的影响

可溶性糖（SS）是植物对抗逆境的一种有效的渗透调节保护剂。由表一分析可知，随着温度的升高，大豆幼苗叶片的可溶性糖含量显著增加，且在对大豆幼苗进行40℃高温处理时，可溶性糖含量明显高于其它温度的热害处理，并随着胁迫时间的延长持续增加。对大豆幼苗叶片进行30℃高温胁迫时，随着胁迫时间的延长，可溶性糖含量的增加较缓慢，上升的幅度并不大；40℃高温处理时，大豆幼苗叶片可溶性糖含量从第3d后增加接近线性变化。热害处理第9d时，32℃、36℃、40℃胁迫下的可溶性糖含量分别是第0d含量的3.70、6.71、7.98倍。这一结果与涂三思、秦天才就高温胁迫对黄姜叶片可溶性糖含量的影响的研究结果相似[10]。