由于丙酮是水生生物学试验中常用的助溶剂，克氏原螯虾是水生生物毒理试验的常用研究对象，而在我们平时的实验中，关于丙酮作为助溶剂时对毒性试验的影响却鲜有人研究。因此我们展开针对丙酮对克氏原螯虾的毒性研究，对分析排除试验中丙酮对克氏原螯虾影响具有一定的参考意义，有利于丙酮的使用时控制在安全浓度以内。

2 材料与方法 

2.1 试验材料 

2.1.1 试验用虾

    试验用克氏原螯虾采于江苏省新大运生态农业开发有限公司所属养殖基地（盱眙）挑选其中附肢齐全、健康活泼、规格一致的个体作为试验用虾。随机分组，每组放8尾，设置五个浓度组和一个对照组。平均体长7.2cm±0.2，平均体重21g±2，试验前 24 h停止喂食。

2.1.2 试验用水 

   实验室玻璃缸养殖系统中每缸放水30 L，试验用水为经充分曝气的自来水。我们此次试验的平均水温为11℃。

2.1.3 试验容器

    试验容器为容量90L的玻璃缸养殖系统。实验开始前，实验室玻璃缸养殖系统用高锰酸钾浸泡消毒1小时。

2.2 试验方法

试验在淮阴师范学院水产养殖实验中心进行，期间不喂饵料，每天测量水温并且连续曝气增氧。

2.2.1 预试验

以5-25ml/L为浓度范围，设置了五个浓度梯度，分别为5、10、15、20、25mL/L，每个试验缸放8只克氏原鳌虾并每天观虾的行为及存活状况，根据实验结果找出正式实验的浓度范围。

根据预试验结果，在5mL/L的浓度时，96h龙虾死亡率为0，而在15mL/L的浓度下，72h时龙虾死亡率为100%。所以，在5和20mL/L之间设置五个浓度梯度，确定正式试验浓度分别为6、8、10、12、14mL/L。

2.2.2 正式试验 源'自^751],论`文'网]www.751com.cn

通过预试验，设置1个对照组和5个浓度梯度组。设置1至5个浓度分别为6、8、10、12、14mL/L。对照组为0 mL/L(见表1)。将所需丙酮用量筒准确称量后,缓慢倒入实验缸内，充分搅拌均匀。然后在每个实验缸内各放克氏原鳌虾8只，实验期间,为保证容器中实验浓度的稳定，每24h更换一次丙酮，每24h测量一次养殖用水的温度和pH，实验期间不喂食并每24h换水一次，及时捞出死亡个体，以防污染到水质，影响到实验效果。

试验开始后每3小时观察一次,并将12h、24h、36h、48h、60h、72h、84h、96 h成虾的中毒反应情况仔细记录下来，试验共持续96 h。

不同浓度及不同时间下克氏原螯虾中毒症状和死亡数目都需记录下来。判断克氏原螯虾的死亡标准，以细玻璃棒触及腹部5分钟内不产生刺激反应为准。

2.2.3 数据处理

死亡率 = 死亡虾数／受试虾总数×100 %

根据克氏原螯虾的死亡数和死亡时间，计算不同时间其死亡率。根据回归方程分别计算 72h 和 96h 的半致死浓度 LC50。

安全质量浓度按下式计算：

安全质量浓度 = 96 h半数致死质量浓度×0．1

3 结果分析

3.1 克氏原螯虾在丙酮环境中的急性毒性表现

根据实验结果，质量浓度为14 mL/L时36h后克氏原鳌虾100% 死亡 ,质量浓度为6 mL/L时84h后克氏原鳌虾0% 死亡。