目前有多种方法来提取蛋黄中的类胡萝卜素，各有优劣。如有机溶剂提取法、超声波和微波辅助提取法、高压脉冲电场辅助提取法、酶反应法及超临界二氧化碳提取法等[12]，那么本次试验将研究两种提取类胡萝卜素的方法，分别是有机溶剂提取法和微波提取法，由此来计算鸡蛋中类胡萝卜素的得率。通过计算加标回收率来判断这两种方法是否适合提取鸡蛋中的类胡萝卜素。

2 材料与方法

2.1 材料 

    新鲜鸡蛋：试验用鸡蛋全部购于淮安市淮阴区农工商超市。

2.2 实验试剂

丙酮                分析纯           上海化学试剂公司

石油醚（30-60°C）   分析纯           上海化学试剂公司

抗坏血酸            分析纯           上海化学制剂公司

BHT                 分析纯           上海化学试剂公司

无水碳酸钠          分析纯           南京化学试剂有限公司

类胡萝卜素标准品  （批号20150105） 上海金穗生物科技有限公司

2.3 仪器和设备

分蛋器                          永康市胜达工具厂

紫外可见分光光度计              上海精密仪器科学有限公司

旋转蒸发仪                      上海亚荣

冷冻干燥机                      北京碧浪实验设备有限公司

天平                            上海精密仪器科学有限公司

LG LGWD700微波炉

台式高速冷冻离心机（Centrifuge5810R Eppendorf）

2.4 方法

2.4.1 材料处理

取10枚鸡蛋，分离蛋黄搅匀后，在真空冷冻干燥机中冻干获得97.05 g蛋黄冻干粉，经粉碎机粉碎后至于干燥瓶中保存备用。

2.4.2 类胡萝卜素提取流程

常规提取流程工艺：蛋黄粉→称重→有机溶剂浸提→收集滤液→清洗→离心→旋转蒸发浓缩→定容→类胡萝卜素吸光度检测。

微波提取工艺流程：蛋黄粉→称重→微波加热→离心→真空浓缩→定容→类胡萝卜素吸光度检测

2.4.3 类胡萝卜素标准曲线绘制来.自/751论|文-网www.751com.cn/

在查阅文献的基础上，于紫外可见分光光度计在200~800 nm波段来做类胡萝卜素的波长扫描，根据扫描结果得出类胡萝卜素的最大吸收峰λmax =447。

类胡萝卜素标准品溶液的制备：将类胡萝卜素标准物质20 mg用适量丙酮（20 mL）溶出转移至小烧杯中，加入10 mg抗坏血酸，在小烧杯里放入10 mg BHT，然后使用石油醚将其定容到50 mL并摇均匀，即配成浓度为400 μg/mL类胡萝卜素标准溶液的使用溶液，转移至棕色试剂瓶中冷冻贮存备用。

标准曲线的测绘：用1 cm比色杯，在λmax下，以含有相同浓度的抗坏血酸+BHT的石油醚丙酮(沸程要与提取胡萝卜素用的石油醚相同)溶液为参比溶液，测定按表1配制好的一系列标准溶液的吸光度值∆Aλmax，然后用Excel软件绘制出该标准工作曲线。