1.3.2  可溶性蛋白含量测定[12]

采用考马斯亮蓝G-250染色法。取0.3g大豆叶片，用2ml蒸馏水研磨成匀浆。转入到离心管中。用6ml蒸馏水将研钵冲洗2-3次。将洗涤液倒出，放入离心管中。在室温下将离心管搁置1h，保证充分反提取。然后在3000r/min离心条件下离心10min。将上清液倒出，加入10ml容量瓶中，定容备用。试管中添加0.3ml样品提取液，考马斯亮蓝G-250蛋白试剂5ml，摇匀。放置2min，在595nm波长下检测吸光度。

1.3.3  游离脯氨酸含量测定[13]

采取茚三酮法测定。取0.5g大豆叶片，研磨后分别倒入试管中。倒入3%磺基水杨酸溶液5ml。沸水中摇动提取10ml，取出试管。冷却后过滤，吸取2ml提取液，倒入2ml冰醋酸、2ml酸性茚三酮试剂。沸水中处理30min，冷却后倒入4ml甲苯，摇荡30s。然后静置。取静置了的上层液到10ml离心管中。3000r/min离心10min。离心后将上层溶液吸出，加入比色皿中。空白对照用甲苯来做。检测520nm处的吸光度。

1.3.4  丙二醛含量测定[13]

采用硫代巴比妥酸法。取0.5g大豆叶片，倒入10％TCA4ml研磨。研磨成匀浆后再倒入2ml TCA接着来!自~751论-文|网www.751com.cn A研磨。在3000r/min下离心10min。吸取上清液3ml，用同等蒸馏水作空白对照。加入0.67%TBA溶液3ml，混匀。水浴锅煮沸30min，冷却后再离心。测定450nm、532nm和600nm处的吸光度。

1.3.5  过氧化氢酶活性测定 [14] 

采用紫外吸收法。取0.5g大豆叶片，倒入2mlPH7.0的磷酸缓冲液。在冰浴条件下研磨成匀浆。加1ml磷酸缓冲液，移到离心管里。用2ml磷酸缓冲液冲洗研钵，冲洗液移到离心管。在4℃冷冻离心机中离心15min，转速为4000r/min。取出之后冷冻保存。25OC预热，依次倒入0.5ml0.1MH2O2。加H2O2时立刻计时倒入比色杯。记下240nm处瞬间吸光度值。每隔1min读数1次，共读下5个数值.

1.4. 数据分析

采用Microsoft Excel 2003进行作图和数据的分析，