2材料与方法

2.1供试拟南芥材料

本研究采用的拟南芥材料为罗永海老师选取的10个不同海拔来源的、列于“附录一”中的野生种质，通过遗传杂交、耗时3年构建的一个“多亲本高级杂交群体（简称MAGIC群体: Multiparent Advanced Generation Inter-Cross）”，群体，即利用10个不同海拔来源的材料，进行了4代、连续的人工遗传杂交（IC1-IC4），最大程度的将不同亲本来源的遗传物质均一化，打破原有遗传物质的连锁关系，打破原有的自然选择结果，构建成一个无自然选择偏向性的基因库。

2.2 MAGIC群体的种植（野外实验设计、种子萌发与栽培）

野外实验设计：在生科院实验花房室外划出5*3m2的空地作为实验基地，考虑到春季昆虫及蛞蝓对拟南芥植株的破坏作用，以白色纱网、木棒及订书钉为材料铺在空地表面及在空地上空做成一个封闭式的大棚。之后将已移栽拟南芥植株的泥陶花盆放置其中进行培养。

种子萌发及种植：所有实验材料均于2014年3月11日播种，经春化等处理于3月17日萌发，一周后移栽至装有黑土的小花盆中，并放于20℃的温室中培养。植株在温室中培养18天后，将其转移至泥陶花盆中，待根固定后移至室外的实验大棚内进行夜野外试验。室外培养的植株总数为266株，为后续的管理，对这些实验植株进行插标签编号。另外，为保证拟南芥的正常生长，培养拟南芥的介质采用黑土：徐州土=3:1、适量的珍珠岩的混合物以保证足够的营养及良好的排水性和通气性。

拟南芥植株的管理：因实验材料种植在室外，为满足植株生长对于水分的需求，除了阴雨天外，于每日早上七点多进行浇水直至土壤全部湿润为止。每日早晨除了浇水外，同时观察植株的生长状况并定期除草。因本实验是在野外进行，植株处于自然环境中受到各种因素的影响，例如植株意外枯死、后期青虫的啃咬等因素，因此在整个实验进行中都会定期清理空的泥陶花盆。在获得实验所需数据后，继续培养植株并收集并保存种子，以待后续研究用。来!自~751论-文|网www.751com.cn

2.3 表型测量及材料收集

拟南芥性状的测定包括抽薹时间、抽薹时莲座叶数目、抽薹时植物的莲座叶直径大小、开花时间、开花时的植物总高度的测定(表2-1)。

抽薹时间：植株从萌发到抽薹的天数。抽薹以刚能在顶端看到花芽为标准，每天早晨观察每株的生长状况，记录抽薹时间并插入一支牙签作为该性状已作测量的标记。

抽薹时莲座叶的数目：与抽薹时间同时测量，记录莲座叶总数并插入一支牙签表明该性状已测。

抽薹时植物的莲座叶直径大小：与抽薹时间同时测量，用刻度尺进行测量，取最长的直径记录并插入牙签作为标记。

开花时间：植物从萌发到第一朵花开放的时间。每天早晨观察每一株植株，记录开花时间并插入牙签作为标记。

开花时植物的总高度：植物第一朵花开放时，从培养介质表面到植株最高点的长度。在计算开花时间的同时用刻度尺对植物高度进行测量，并插入牙签作为标记。