（2）醇沉体积
    在醇沉条件为70%乙醇，醇沉5h，加入不同体积的乙醇，探索乙醇的加入量对醇沉效果的影响。
  （3）醇沉时间
    在醇沉条件为乙醇浓度70%，4倍于提取液体积的乙醇，选择不同的醇沉时间探索其对醇沉效果的影响
2.4.4 响应面优化
  （1）水提工艺优化
     根据Box-Benhnken的中心组合实验设计原理单因素影响实验结果，选取浸提取时间、水料比、提取温度对白芨多糖浸提影响显著的三个因素，在单因素试验的基础上采用三因素三水平的响应面分析方法，以优化水提工艺。【12】
  （2）醇沉条件优化
     根据Box-Benhnken的中心组合实验设计原理单因素影响实验结果，选取乙醇浓度、醇沉体积、醇沉时间对多糖沉淀影响显著的三个因素，在单因素实验的基础上采取三因素三水平的响应面优化方法，得到最佳醇沉条件。
2.4.5 提取液多糖含量的测定
（1）总糖的测定【13】
    1）40ug/mL葡萄糖标液的配置
     精密称取干燥至恒重的葡萄糖0.040g，置于50mL烧杯。加入20mL蒸馏水溶解，溶解移入100mL容量瓶。用蒸馏水50mL分三次洗涤烧杯，洗涤液移入容量瓶。最后蒸馏水定容，摇匀备用。是为标准溶液。
2）6%苯酚试剂的配置
 苯酚常温下为固态，用之前放入水浴中加热融化，用50mL小烧杯称取6g苯酚，加水转移到100mL容量瓶中，定容至100mL。4℃冰箱中保存备用。
3）标准曲线的制作
表2.1 苯酚硫酸法测定白芨提取液总糖
试管编号    0    1    2    3    4    5    6    7    8
标准溶液(mL)    0    0.4    0.6    0.8    1.0    1.2    1.4    1.6    1.8
蒸馏水(mL)    2    1.6    1.4    1.2    1.0    0.8    0.6    0.4    0.2
6%苯酚(mL)    1    1    1    1    1    1    1    1    1
浓硫酸(mL)    5    5    5    5    5    5    5    5    5
            静置10min后，振荡器摇匀            
            室温静置20min            
     按表2.1将个试管编号后加入溶液。
以0号管为空白校正，于波长490nm处检测其他各管吸光度。
4) 样品测定
     按下表加入提取液测其吸光度值。
表2.2 样品总糖检测
试管编号    S1    S2    S3
提取液(mL)    1    1    1
蒸馏水(mL)    1    1    1
6%苯酚(mL)    1    1    1
浓硫酸(mL)    5    5    5
5）计算方法
     以0~9号管的吸光度作为横坐标(X)，对应浓度为纵坐标值(Y),用Oringin作图，显示公式和R平方值，得到浓度和吸光度之间的线性关系，把S1，S2，S3吸光度取平均值后带入线性方程中，得出样品溶液总糖含量C0。 白芨有效成分的提取及功效评价(6):http://www.751com.cn/shengwu/lunwen_8717.html