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分光光度法快速测定果蔬中农药残留的研究(15)

时间:2016-12-29 16:07来源:毕业论文
20 0.303 0.131 0.1010 0.0437 56.77 25 0.437 0.193 0.1458 0.0643 55.90 30 0.498 0.218 0.1661 0.0727 56.23 将对应的数据代入以上公式,即可求得空白斜率、农药斜率、抑制率。由表


20    0.303    0.131    0.1010    0.0437    56.77
25    0.437    0.193    0.1458    0.0643    55.90
30    0.498    0.218    0.1661    0.0727    56.23
将对应的数据代入以上公式,即可求得空白斜率、农药斜率、抑制率。由表3.6.1可知,随着酶液用量的增加,空白斜率和农药斜率都呈上升趋势,但是抑制率无明显变化。斜率增大可以增加灵敏度,但是相应的试剂费用也会增加。所以,从灵敏度和试剂费用两者的综合考虑来看,最后还是选择中间那组,即原配方的酶液用量,酶用量为20uL。
3.6.2 改变底物用量对抑制率的影响
为了验证是否原配方是最佳的方案,我就尝试着改变试剂包中各种物质的量。原配方是:20uL酶+2.5mL样品+100uL显色剂+20uL底物。接下来就改变底物的用量,分别为10uL、15uL、20uL、25uL、30uL。而样品、显色剂、酶的量不改变,样品是浓度为0.1mg/L的敌敌畏。测得实验数据如下表3.6.2所示。
表3.6.2 底物用量对抑制率的影响
底物用量(uL)    △Ao(空白反应3min的变化值)    △At(农药反应3min的变化值)    空白斜率(Ko)    农药斜率(Kt)    抑制率Y(%)
10    0.098    0.043    0.0327    0.0143    56.12
15    0.148    0.065    0.0493    0.0217    55.98
20    0.303    0.131    0.1010    0.0437    56.77
25    0.417    0.184    0.1390    0.0613    55.90
30    0.471    0.206    0.1570    0.0687    56.24
    空白斜率、农药斜率、抑制率的计算公式,如P27中3.6.1所示,代入对应的数据即可求得。由表3.6.2可知,随着底物用量的增加,空白斜率和农药斜率都呈上升趋势,但是抑制率无明显变化。斜率增大可以增加灵敏度,但是相应的试剂费用也会增加。所以,从灵敏度和试剂费用两者的综合考虑来看,最后还是选择中间那组,即原配方的底物用量,底物用量为20uL。
3.6.3 改变显色剂用量对抑制率的影响
为了验证是否原配方是最佳的方案,我就尝试着改变试剂包中各种物质的量。原配方是:20uL酶+2.5mL样品+100uL显色剂+20uL底物。接下来就改变显色剂的用量,分别为50uL、80uL、100uL、130uL、150uL。而样品、底物、酶的量不改变,样品是浓度为0.1mg/L的敌敌畏。测得实验数据如下表3.6.3所示。
表3.6.3 显色剂用量对抑制率的影响
显色剂用量(uL)    △Ao(空白反应3min的变化值)    △At(农药反应3min的变化值)    空白斜率(Ko)    农药斜率(Kt)    抑制率Y(%)
50    0.295    0.130    0.0983    0.0433    55.93
80    0.283    0.125    0.0944    0.0417    55.82
100    0.303    0.131    0.1010    0.0437    56.77
130    0.288    0.127    0.0959    0.0423    55.90
150    0.305    0.132    0.1016    0.0440    56.70 分光光度法快速测定果蔬中农药残留的研究(15):http://www.751com.cn/huaxue/lunwen_1682.html
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