由于有很多实验利用近红外光谱法、薄层色谱法、高效液相色谱法等来测定绿原酸,但是这些方法并不完善，故本课题是先用固相萃取的方法分离富集中成药（以双黄连胶囊为例）中的绿原酸使其达到一定含量，然后利用定量核磁共振波谱法来检测绿原酸。文献综述

1.2 固相萃取的概要

1.2.1 固相萃取技术的基本原理

液固萃取和液相色谱技术经过不断的发展和优化从而产生了固相萃取技术（SPE），SPE技术是对所要检测的样品进行前处理，它可以对我们所需要的目标化合物进行选择性的保留和洗脱。当样品的成分较复杂时，因为离子交换作用，极性或非极性相互作用，在上样时，吸附剂会选择性的保留目标化合物和少量干扰物（性质与目标化合物相近），其余组分透过吸附剂流出小柱，随后用别的溶剂（洗脱能力较强）选择性地把目标化合物洗脱下来，从而完成对复杂样品的分离，纯化和富集。

在做SPE实验时，首先要了解目标化合物的一些物理和化学性质，其次有关于吸附剂，样品溶剂以及洗脱溶剂的选择是实现分离的关键。

1.2.2 固相萃取的类型

刘长武等[1]对SPE的类型进行了概述。分别有：

（1）键合硅胶-SPE 

这是最常用的吸附剂且对一切有机溶剂不会发生变化。该吸附剂的体积不会随溶剂的改变而改变，而且硅的颗粒大小是μ m级的，PH(氢离子浓度指数)在1-14的溶剂都可以使用。异丙醇、甲醇、乙腈等能够用来进行条件化。离子相互作用、非极性相互作用和极性相互作用存在于该吸附剂和分离物之间。

（2）聚合物吸附剂-SPE 

这是聚合物反相吸附剂（聚合二乙烯苯-N-乙烯吡咯烷酮）且它有亲脂和亲水的特征。可用酸、盐、甲醇和水等进行洗脱。

（3）免疫亲和吸附剂-SPE

它有亲水性、惰性（化学，生物方面）和易活化的特征。可以用离线萃取和在线萃取两个方法。

（4）分子嵌入聚合物-SPE

这是高稳定的聚合物。在共价嵌入中，模板印模分子和聚合物的一个组块相匹配，聚合之后，生成的键断裂后才能有自由抉择的结合位。非共价嵌入是依托模板和选择的官能单体间的氢键、离子和亲水性相互作用来自我组合。相互作用的官能团数目越多，选择性也就越多。来`自^751论*文-网www.751com.cn

1.2.3 固相萃取的操作步骤

基本的固相萃取步骤可分为4步：活化，上样，淋洗和洗脱。上样前用合适的溶剂先洗一遍SPE柱，这样可以首先除去留在吸附剂上的杂质，降低了这些杂质对目标化合物的干扰；活化：首先使用的溶剂要具有较强的洗脱能力，这样能够把柱中残留的干扰物除去，随后再用另一种溶剂（洗脱能力较弱）淋洗柱子；上样：将预处理后的样品加入柱子（目的是让目标化合物吸附在柱子上）；淋洗：使用较弱的溶剂把保留不那么好的干扰物先洗下来；洗脱：使用较强的溶剂把目标化合物洗下来，从而达到最终富集的目的。