122幼苗生长试验
将经过消毒的番茄种子浸种催芽,种子胚芽突出种皮后,播于72孔穴盘,育苗的基质为商业化的有机栽培基质(镇江兴农有机肥有限公司,中国),生长期间浇灌日本园试营养液,待幼苗长出2片真叶时,将大小相对一致的健壮幼苗移入32孔穴盘,以石英砂(10目)为基质,将穴盘放入长、宽、深分别为54cm、28cm、6cm的浅塑料托盘中,加入5L 1/2日本园试营养液,每2天更换1次。
待幼苗长到4~5叶1心时,共设12个处理。6个处理用含200 mM NaCl的日本园试营养液培养,分别喷施0、10、50、100、200、500µM的褪黑素溶液;另外6个处理用未加NaCl的日本园试营养液培养,同上喷施对应浓度的褪黑素溶液。每日19:00叶面喷施一次,每2d更换一次营养液。每16株幼苗为一个重复,试验重复3次。
13 测定项目与方法
131 发芽率、发芽势及发芽指数测定
每隔4小时统计一次培养皿中发芽种子粒数,拍照记录种子发芽情况。5天后,待种子不再继续发芽,统计发芽种子数,计算以下指标:
发芽率=发芽种子总数/供试种子总数*100%
发芽势=发芽高峰时(第二天)发芽种子数/供试种子总数*100%
发芽指数=∑(当天发芽种子数/对应发芽天数)
132 幼苗生长指标测定
在幼苗盐处理第10d,测定幼苗的生长指标。每个处理分别取6株幼苗,将石英砂洗净擦干后,测定其株高和茎粗。将幼苗分为地上和地下两个部分,称量鲜重,然后放入120℃杀青30min,80℃烘至恒重,称量其干重。
133 叶绿素含量测定
叶绿素含量参照王学奎等[5]的方法测定。在处理第6d,取顶部向下第3片成龄叶,利用紫外-可见分光光度计(Techcomp UV-1100,Beijing,中国)测定吸光值并计算叶绿素a、叶绿素b、叶绿素a/叶绿素b和总叶绿素含量。
134 H2O2含量的测定
在处理第6d,取顶部向下第3片成龄叶,称重,并快速置于液氮中,之后保存在-80℃超低温冰箱中,备用。H2O2含量参考Chakrabarty等(2008)的方法[6],利用紫外-可见分光光度计(Techcomp UV-1100,Beijing,中国)测定吸光值,并根据公式计算物质含量。
135 电解质渗透率的测定
电解质渗漏率参照Bajji等(2004)的方法测定[7]。在盐处理第6d,取幼苗第3片成熟叶,利用电导率仪(上海雷磁仪器厂DDSJ-308A,上海,中国)进行电导率的测定。电解质渗漏率=煮前电导率(A)/煮后电导率(B)。
136 丙二醛(MDA)含量的测定
丙二醛含量的测定参考Kumar等(1993)的方法[8]。在在盐处理第6d,取顶部向下第3片成龄叶,利用紫外-可见分光光度计(Techcomp UV-1100,Beijing,中国)测定吸光值并计算丙二醛含量。
14 数据处理
采用Excel 2016和SPSS160进行数据分析和绘图,Duncan,s多重比较法进行数据统计分析。
2 结果与分析
21不同浓度褪黑素对盐胁迫下番茄种子发芽指标的影响
由图2可知,经40h 75 mM NaCl胁迫后,处理间发芽率开始出现显著差异。
经120h 75 mM NaCl胁迫后,相比对照949%的发芽率,未经褪黑素处理的种子发芽率只有627%,由此可知盐胁迫显著降低番茄种子发芽率。在0、01、1、10、50、100、500μM褪黑素浓度下,6个不同浓度褪黑素处理的番茄种子间发芽率差异显著,其中50 μM褪黑素缓解盐胁迫的效果最佳,发芽率为887%,其次为10μM褪黑素,发芽率为727%。而100、500μM高浓度褪黑素则加重盐胁迫带来的伤害作用,发芽率分别为613%和607%,进一步抑制种子发芽。 不同浓度褪黑素对盐胁迫下番茄种子发芽及幼苗生理指标的影响(3):http://www.751com.cn/shengwu/lunwen_19388.html