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不同光质对蚂蟥生长及相关免疫酶基因表达的研究(2)

时间:2018-11-23 09:32来源:毕业论文
1.实验材料与方法 1.1实验材料 1.1.1实验材料 实验所用蚂蟥经郭巧生教授鉴定为蚂蟥Whitmania pigra Whitman,由南京农业大学中药材研究所提供;经郭巧生教授鉴


1.实验材料与方法
1.1实验材料
1.1.1实验材料  实验所用蚂蟥经郭巧生教授鉴定为蚂蟥Whitmania pigra Whitman,由南京农业大学中药材研究所提供;经郭巧生教授鉴定,实验所用螺蛳(采自南京前湖,野生)为梨形环棱螺Bellamya purificata Heude;实验用水为曝气24h的自来水。
1.1.2主要仪器和设备  电子天平(山海精密仪器厂);实时荧光定量PCR仪(美国ABI Step one7500);PCR仪(PTC-200,bio-RAD),电泳仪(DYY-6C,北京751一仪器厂);凝胶成像仪(JS-380,上海培清科技有限公司);SYBR® Premix Ex Taq™ (Tli RNaseH Plus) (来自:上海皓嘉科技发展有限公司)(荧光定量);PrimeScript. RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) (来自:上海皓嘉科技发展有限公司)(反转录)。
1.2实验方法
1.2.1实验设计  本实验在室内进行,养殖容器为容积为2L的塑料瓶(瓶底面积为1.33×10-2 m2,实际养殖用水1L,水深12 cm),实验蚂蟥体重为0.028±0.001g。设4个光照条件,分别为红光610±10nm,蓝光450±10 nm,白光full spectrum,自然光,光强范围为60-80μmol•m-2•s-1,分别标记为R、B、W、N组,光照时间为6:00-18:00,3天换水1次,换水量为100%,每个光照处理设置20瓶,每瓶饲养10条蚂蟥。实验时间为60d,期间保持室温为27±1℃。每次每组随机取9条蚂蟥于-80℃保存备用。
1.2.2生长性能的测定  实验开始前测蚂蟥的体重,之后每隔10天测一次蚂蟥的体重,计算出平均质量。 不同光质对蚂蟥生长及相关免疫酶基因表达的研究(2):http://www.751com.cn/shengwu/lunwen_26229.html
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