线粒体中活性氧（ROS）的测定，是利用荧光探针DCFH-DA检验线粒体中ROS，在PCD中，产生信号的ROS来源有两种: 其一，ROS在各种代谢中产生[16]；其二，许多研究者认为超氧化物自由基是在电子链传递过程中产生的。这两种来源的ROS都可能介导PCD，促进PCD机构的激活。
本实验以线粒体为抗真菌作用靶标，研究紫苏醛对黄曲霉和黑曲霉的抗真菌作用，利用荧光探针DCFH-DA检测线粒体中的活性氧（ROS），随着紫苏醛浓度的增加，荧光强度增加，线粒体膜电位（MMP）增加，ROS增加，这些实验结果表明紫苏醛能够有效的抑制黄曲霉和黑曲霉的生长，这个抑制效果与紫苏醛的浓度呈正相关。通过紫苏醛对黄曲霉和黑曲霉线粒体作用的影响，研究紫苏醛可能的抗真菌作用机制，可进一步将其抗菌作用应用到食品，医药，化工等领域。
1 材料与方法
1.1供试材料
1.1.1 原料
紫苏醛：来源于日本东京化成工业株式会社(TCI)
黑曲霉：取自江苏师范大学生命科学学院微生物学实验室。
黄曲霉：取自江苏师范大学生命科学学院微生物学实验室。
1.1.2实验试剂
表1.实验试剂
Table 1 Name of Reagent Tested
试剂名称    化学式    纯度    生产厂家
吐温 80    C64H124O26    化学纯    上海国药
磷酸氢二钠    Na2HPO4•7H2O    分析纯    上海国药
磷酸二氢钠    NaH2PO4•2H2O    分析纯    上海国药
无水葡萄糖    C6H12O6    分析纯    上海国药
琼脂    C12H18O6    实验纯    天津致远
无水乙醇    C2H6OH    分析纯    上海苏懿
氢氧化钾    KOH    分析纯    合肥鑫科
正庚烷    C7H16    分析纯    天津大茂
DMSO    （CH3)2SO    分析纯    山东济宁

1.1.3 试剂的制配
（1）0.1% 吐温-80配置：取300 μL吐温80到量筒中，加蒸馏水到300 mL，再倒入干净的瓶子中，超声波震荡，灭菌。
（2）25% 醇钾溶液（提前一天制备）：在锥形瓶里加35 mL水，称取25g的氢氧化钾倒，放热，不加塞，轻摇待其溶解后倒入量筒，用无水乙醇定容到100 mL，再倒入锥形瓶摇匀。 紫苏醛对黄曲霉和黑曲霉线粒体作用的影响(3):http://www.751com.cn/shengwu/lunwen_30630.html