2 0.25 1 0.4 28
3 0.5 2 0.7 32
2.2.4.γ- 癸内酯萃取
萃取是通过溶质在两个液相之间的竞争性溶解(分配)而实现的。因而,溶液中物质的溶解作用是必需的,也是溶剂萃取技术开发过程中溶剂选择的前提。合适的有机溶剂是溶剂萃取能否成功的关键,一个良好的溶剂应该满足如下条件:1)有很大的萃取容量,即单位体积的萃取溶剂能萃取大量的产物;2)有良好的选择性,理想的情况是只萃取产物而不萃取杂质;3)与被萃取的液相(如水相)互溶度要小,且粘度低,界面张力小或适中,有利于相的分散和两相分离;4)溶剂的回收和再生容易;5)化学稳定性好,不易分解,对设备腐蚀性小;6)经济性好,价廉易得;7)安全性好,闪点高,对人体无毒或毒性低。
通过翻阅参考文献[13]得到的数据,γ- 癸内酯在苯和正己烷中的含量最大,提取率都可以达到80%左右。对比两者,根据上述的参考原则,苯有毒性,导致操作性不强,正己烷在此方面优于苯,而且根据正己烷,苯,乙醇的介电常数可知正己烷和乙醇-水的互溶度较小(苯:0.178% 正己烷:0.00095%),因此,本次实验采用正己烷作为萃取剂。
萃取方法:
抽取1ml发酵液,加入正己烷,在室温下进行萃取,4000r/min振荡混匀lmin,离心分离15000r/min,15min,吸出上清液并用0.22μm的微孔滤膜过滤,留存。
2.2.5γ- 癸内酯定量检测
气相色谱检测法:
(1)对照样品
取0.l ml用化学方法制取得γ- 癸内酯,溶于9 ml正己烷中,混匀。从中取0.lml溶于9.9ml正己烷中,得到0.01%浓度的标样。
(2)仪器和工作条件
GC检测γ- 癸内酯的条件:HP-5柱(30 m x 0.32 mm x 0.25μm,)载气为高纯氮气,流速为0.8mL/min。分流比为10:1,采取程序升温方式,40℃到170℃段以20℃/min升温,170到180以2℃/min升温,180到280以10℃/min升温,进样口温度为250℃,氢火焰离子检测器(FID)检测温度为300℃,进样体积为1微升,γ- 癸内酯在177℃出峰
3实验结果与讨论
3.1菌种筛选
3.1.1菌种初筛
菌种的优良与否对发酵结果有着直接的影响,将17种市售的干酵母粉作为目标。通过发酵实验得到GDL产量见表3.1.1和图1:
表3.1.1 17种干酵母粉初筛GDL产量
菌种代号 峰面积 GDL浓度(mg/L) 菌种代号 峰面积 GDL浓度(mg/L)
1 5.3 12.6 10 11.4 27.2
2 12.4 29.6 11 10.9 26
3 5.7 13.6 12 5.7 13.6
4 25.5 60.8 13 1.9 4.5
5 16.8 40.1 14 4.7 11.2
6 27.1 64.6 15 4.5 10.7
7 23.9 57 16 5.4 12.9
8 5.2 12.4 17 9.5 22.6
9 0 0
(注:气相标样浓度 900mg/L;标样峰面积 377.5) 生物转化法制备天然香料丙位癸内酯的初步研究(6):http://www.751com.cn/shengwu/lunwen_3174.html