1材料与方法 

1.1 实验材料

1.1.1材料选择与处理

  本试验选用南京农业大学句容实验基地多年生品种‘白罗莎’葡萄为试材。根据本实验室以往的研究证明，花前10天处理能达到98%的无核率[3]。在花蕾形成初期用40ppmGA浸蘸花穗，依据‘白罗莎’生长发育特性，分别于葡萄幼果膨大期、硬核期、第二次果实膨大期和转色期采集不同植株不同部位的果实样品。采集后样品用液氮速冻后保存于-20℃冰箱。

1.1.2基因组数据库序列来源

美国生物技术信息中心NCBI；葡萄全基因数据库；PLANTCARE(http://bioinformatics.psb.ugent.be/webtools/plantcare/html/)。

1.1.3主要仪器设备

电泳仪；PCR仪；超低温冰箱；台式高速冷冻离心机；紫外凝胶成像系统；电热恒温水浴锅；电泳槽。

1.1.4主要试剂

 dNTP MIX（TaKaRa）、 RNase-Free DNase（Promega）、Taq polymerase（TaKaRa）、DL2000 Plus DNAMarker、其他试剂均为国产分析纯。引物由上海生物工程有限公司合成，引物序列见表3。