银杏内生真菌会因栖息环境而有选择性的繁衍，也会因树龄及组织上的丰富度不同而选择性存活。研究表明，银杏内生真菌的生命力会因银杏生理状况的改变而改变，随着树龄的增加而抵抗真菌的感染能力越弱。内生真菌分离的种数会因材料的采集、分离时间的不同而有所不同，且其中优势的菌群也有很大的差异，其中以曲霉属、青霉属、交链孢属、刺盘孢属和镰孢菌属比较多。银杏内生真菌能够影响银杏内某些活性物质的质量或产量，甚至能合成并转化与宿主相类似的生物活性物质，科研价值具有良好的前景。

2 实验材料与方法

2.1 材料与设备

2.1.1 菌种来源

2016年2月采自江苏泰兴古银杏森林公园、邳州官湖银杏园、铁富银杏基地、邳州运河师范学院、港上国家银杏博览园、江苏师范大学泉山校区内，分离内生真菌所用的银杏组织均来自树龄从5年到50年不等的无病虫害的健壮的银杏树木。

2.1.2 主要仪器与设备

表1-1 使用仪器名称目录

Table1-1 Equipments used in this study

仪器名称 型号 厂家

自动高温高压灭菌锅 MLS-302C SANYO Electric Co Ltd

双人单面超净灭菌工作台 Bo-Xun 上海博讯医疗设备厂

精密电子天平 BSA2245 北京博医康技术公司

超低温冰箱 HFU586 Basic Thermo Electron LED GmbH

医用冷藏箱 HYC-260 苏州赛恩斯仪器有限公司

美国梯度PCR仪 AB veriti 美国Applied Biosystems (AB)公司

凝胶成像仪 Gel-Doc型 美国伯乐仪器公司

电热恒温培养箱 DNP-9052型 上海精宏实验设备公司

器皿柜 MeiJiaLi HK美加丽实验室装饰（香港）集团公司

微波炉 KD21B-C 美的集团有限公司

电磁炉 IC TW 2104 江苏松桥电器有限公司

2.2 分离培养基的设计

2.2.1 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)：马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂20g,源Z自L751W文·论^文]网[www.751com.cn，蒸馏水1000 mL，PH=7，121℃，20min灭菌[9]。

1.2.2察氏培养基：蔗糖30 g，NaNO3 3 g，KCl 0.5 g，FeS04•7H2O 0.01 g，MgS04•7H2O 0.5 g，KH2PO4 1 g，琼脂20 g，蒸馏水1000 mL，PH=7，121℃，20 min灭菌。

1.2.3马丁培养基：葡萄糖10 g，蛋白胨5 g，KH2PO4 1 g，MgS04•7H2O 0.5 g，琼脂20 g，蒸馏水1000 mL，PH=7，121℃，20 min。

1.2.4 CYM培养基：葡萄糖20 g，蛋白胨2 g，酵母浸膏2 g ，MgS04•7H2O 0.5 g，KH2SO4 0.46 g，K2HS04 1 g，琼脂20 g，蒸馏水1000 mL，PH=7，121℃，20 min灭菌[10]。