2.2  实验方法 8

2.2.1  鲫鱼淋巴细胞的分离与诱导 8

2.2.2  透射电镜观察细胞凋亡 8

2.2.3  用流式细胞仪来检测细胞内钙离子的变化情况 8

2.2.4  用流式细胞仪来检测细胞的活性氧物质(ROS) 的变化规律 8

3  结果 9

3.1  1,4二恶烷毒素诱导鲫鱼淋巴细胞凋亡透射电镜观察 9

3.2  1,4二恶烷毒素对鲫鱼淋巴细胞内ROS的影响 9

3.3  1,4二恶烷毒素对鲫鱼淋巴细胞内钙离子的影响 10

4  讨论 11

5  结论 12

参考文献： 13

致谢 15

1  引言

1.1  1，4-二恶烷的概述

进入21世纪，我们生活的地方，城市化脚步越来越快，人口数量越来越多，经济越来越发达，资源的开发与利用越来越多样化，由此带来的环境破环、环境污染问题开始显现。在2009年末到2010年初，国内外的某洗发水风波，让我们关注了解到了一种原本以为离我们很遥远的毒物——1,4-二恶烷。然而，国家对于1,4-二恶烷的控制标准和检测标准还存在空缺，使这一风波演变成了公共卫生事件。引起了大众的不安与恐慌[1]。由于1,4-二恶烷是一种无色液体，稍有香，其广泛存在于我们生活的角角落落，我们所接触的各种生活用品都有它的身影，不仅仅在洗发水添加剂，甚至包括婴儿奶瓶合成原料也有它的成分，令人防不胜防。

其化学结构中2个氧原子的存在，使得1,4-二恶烷的亲水性大大增强，使其在水中溶解性好且稳定。人类一旦将废水直排至自然水体、固废处理处置不当，将其随意丢弃至土壤，造成土壤污染，经过雨水循环进入地下水，使水体的生物遭受污染，经过生物链循环，生物链放大，最后影响到人类，对人类造成更严重的危险。

1.2  1,4-二恶烷的污染毒理学特征

1.2.1亚慢性毒性

二恶烷通过一些途径，如：经口误食、误吸等，通过吸收进入体内循环，由于其具有很强的蓄积作用，达到一定剂量后有麻醉和刺激作用。接触大量二恶烷蒸气会引起眼和上呼吸道刺激，伴有头晕、头痛、嗜睡、恶心、呕吐等。可致肝、皮肤损害，甚至发生尿毒症[2-3]。毒理上，国内外都进行了很多细胞和分子生物学研究。二恶烷可与人体血红蛋白结合，随着体积分数的增加能造成血红蛋白的凝固变性。饮水染毒实验死亡的大鼠嗅觉上皮细胞核扩大，肝中央区肿胀，近端肾小管水肿[4]。注射染毒实验造成大鼠体内肝微粒体蛋白增多，雄性大鼠细胞色素b5和P450增高，含二恶烷8000 mg/m3的气体反复吸入30天后，兔子出现致死性肾损伤[5]。

1.2.2急性毒性

二恶烷对皮肤、眼部和呼吸系统有刺激性，并且可能对肝、肾和神经系统造成损害，急性中毒时可能导致死亡[6]。

大鼠吸入 LC50 142600mg/m3 （4小时）

大鼠经口 LD50 5170 mg/kg（体重），另有报道 5600, 6200,7120, 7350 mg/kg 不等。

小鼠经口 LD50 5660 mg/kg

豚鼠经口 LD50 3900 mg/kg

兔经口 LD50 2500 mg/kg，另有报道2000，4000mg/kg。

猫经口 LD50 3500 mg/kg

狗经口 LD50 2000 mg/kg，另有报道 4000mg/kg。 1,4 二恶烷对鱼体淋巴细胞的凋亡效应研究(2):http://www.751com.cn/shengwu/lunwen_53752.html